Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-AMPKa1/AMPKa2-T183/T172 para WB, ELISA - Q13131 / P54646

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AMPKa1/AMPKa2

• La proteína quinasa activada por 5'-AMP (AMPK) es una quinasa serina/treonina heterotrimérica que actúa como sensor de energía, manteniendo la homeostasis energética celular. Las subunidades catalíticas α (α1 codificada por PRKAA1 y α2 por PRKAA2) se activan tras la fosforilación en Thr-183 (α1) o Thr-172 (α2) en respuesta a niveles elevados de AMP/ADP y quinasas aguas arriba. Referencias relacionadas: PMID:17307971, PMID:17712357

• AMPK regula el metabolismo lipídico fosforilando la acetil-CoA carboxilasa (ACACA/ACACB) y la HMG-CoA reductasa, inhibiendo así la síntesis de ácidos grasos y colesterol. También promueve la lipólisis a través de la fosforilación de la lipasa sensible a hormonas (LIPE).

• En la homeostasis de la glucosa, AMPK mejora la captación de glucosa muscular promoviendo la translocación de SLC2A4/GLUT4 y modula la gluconeogénesis hepática vía fosforilación de CRTC2/TORC2. También regula las enzimas glucolíticas PFKFB2/3.

• AMPK controla el crecimiento y la proliferación celular inhibiendo la vía mTORC1 mediante la fosforilación de TSC2 y RPTOR, y fosforilando FNIP1 para suprimir la señalización no canónica de mTORC1, promoviendo así la autofagia mediante la activación de ULK1. Referencias relacionadas: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666

• La quinasa fosforila múltiples factores de transcripción y co-reguladores (p. ej., FOXO3, p53, SREBF1/2, HNF4A, CRTC2, HDAC5, MEF2C, PPARGC1A, EP300) para ejercer respuestas metabólicas y al estrés a largo plazo, y media la regulación de la cromatina vía fosforilación de la histona H2B. Referencias relacionadas: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171

• La localización subcelular incluye citoplasma, núcleo y endosomas tardíos, permitiendo que AMPK coordine programas metabólicos y transcripcionales entre compartimentos. También está involucrada en la iniciación de la autofagia y la dinámica mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:34077757, PMID:36367943

• Funciones adicionales incluyen la regulación del ritmo circadiano vía fosforilación de CRY1, la señalización Wnt mediante la estabilización de CTNNB1, y la actividad quinasa de la proteína tau bajo exposición a beta-amiloide. AMPKα1 también está implicada en la ferroptosis y respuestas a la hipoxia a través de la fosforilación de ALDH7A1. Referencias relacionadas: PMID:31492851, PMID:40233740

• AMPKα1 sufre empalme alternativo y es modificada por conjugación tipo ubiquitina (Ubl). La proteína es una glicoproteína y fosfoproteína, con actividad quinasa dependiente de metales que requiere magnesio.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un fosfopéptido sintético que rodea la Thr-183 de AMPKα1/α2 humana; es recomendable verificar la fosfo-especificidad mediante tratamiento de lisados celulares con λ-fosfatasa o competición con péptido.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 64–65 kDa (α1) y 62 kDa (α2). Pueden aparecer múltiples bandas debido a variaciones de isoforma y estados de fosforilación; utilice controles negativos apropiados (bloqueo con péptido no fosforilado) para confirmar la especificidad de la señal.
• Este anticuerpo es adecuado para ensayos por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA); considere emparejarlo con un anticuerpo de AMPKα total para normalizar las señales fosfo en enfoques cuantitativos.
• Debido a la alta conservación de secuencia, se reporta reactividad cruzada con AMPKα de ratón y rata; valide en la especie y contexto tisular relevante.

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