Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-ATM (S1981) para WB y ELISA - Q13315

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATM

• ATM es una proteína quinasa serina/treonina que actúa como un sensor clave de daño en el ADN, activando la señalización de puntos de control en respuesta a roturas de doble cadena (DSB) y estrés genotóxico (PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365).
  Referencias relacionadas:
  PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365

• Reconoce el motivo consenso [ST]-Q y fosforila numerosos objetivos posteriores, incluyendo p53/TP53, CHEK2, BRCA1 y otros, para orquestar la reparación del ADN y la detención del ciclo celular (PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669).
  Referencias relacionadas:
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• Un paso crítico temprano en la señalización de DSB es la fosforilación mediada por ATM de la histona H2AX en Ser139, marcando la cromatina que flanquea los sitios de rotura (Por similitud).

• ATM también funciona en la exclusión alélica de células B pre, el desarrollo de células T y la transducción de señales, y se considera un supresor de tumores.

• La quinasa se localiza en el núcleo, pero también en vesículas citoplasmáticas, el centrosoma y los peroxisomas, donde fosforila PEX5 para promover la pexofagia en respuesta a especies reactivas de oxígeno (ROS) (PMID:26344566).
  Referencias relacionadas:
  PMID:26344566

• ATM fosforila ERCC6 para facilitar el remodelado de la cromatina en las roturas de doble cadena del ADN (PMID:29203878), y fosforila TTC5/STRAP en Ser203 para impulsar su translocación nuclear después del daño en el ADN (PMID:15448695).
  Referencias relacionadas:
  PMID:29203878, PMID:15448695

• La fosforilación de DYRK2 por ATM en sitios nucleares protege a DYRK2 de la ubiquitinación mediada por MDM2 y la degradación proteosomal tras el estrés genotóxico (PMID:19965871).
  Referencias relacionadas:
  PMID:19965871

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un fosfopéptido sintético correspondiente al sitio de fosforilación S1981 de ATM humana; se espera especificidad solo para la forma fosforilada.
• Para Western blotting, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y lavado para preservar la fosforilación. Considere verificar la especificidad fosfo mediante el tratamiento de muestras con fosfatasa lambda de proteínas o realizando experimentos de bloqueo con péptidos.
• Debido al gran tamaño de ATM (~351 kDa), utilice un gel de acrilamida de bajo porcentaje (ej. 6%) y tiempos de transferencia prolongados. Un gel gradiente (4-15%) también puede mejorar la separación.
• Valide el anticuerpo en su sistema modelo específico; se reporta reactividad cruzada con ratón, pero el rendimiento en otras especies debe probarse individualmente.
• Para ELISA, confirme las condiciones de recubrimiento y detección, ya que los anticuerpos fosfo-específicos pueden requerir un pH del tampón y reactivos de bloqueo optimizados.

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