Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-BRCA1 (S988) para IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de BRCA1

• La proteína de susceptibilidad al cáncer de mama tipo 1 (BRCA1), también conocida como proteína 53 con dedo RING (RNF53), es una ligasa E3 de ubiquitina-proteína que media específicamente la formación de cadenas de poliubiquitina unidas por 'Lys-6', desempeñando un papel central en las respuestas celulares al daño del ADN. Referencias relacionadas: PMID:10500182 PMID:12887909 PMID:12890688
• El heterodímero BRCA1-BARD1 coordina diversas vías, incluidas la reparación del ADN, la ubiquitinación y la regulación transcripcional, para mantener la estabilidad genómica. Referencias relacionadas: PMID:12890688 PMID:14976165 PMID:20351172
• BRCA1 es necesario para las detenciones apropiadas del ciclo celular después de la irradiación ionizante tanto en fase S como en fase G2, y contribuye a la reparación por recombinación homóloga (HRR) mediante la interacción con PALB2 y el ajuste fino de la carga de BRCA2-RAD51 en las roturas del ADN. Referencias relacionadas: PMID:10724175 PMID:11836499 PMID:12183412 PMID:19369211
• Regula la nucleación de microtúbulos centrossómicos e inhibe la síntesis de lípidos al unirse a ACACA fosforilada inactiva, evitando su desfosforilación. Referencias relacionadas: PMID:18056443 PMID:16326698
• El complejo BRCA1-RBBP8 controla la activación del punto de control G2/M mediante la ubiquitinación de RBBP8, lo que ilustra un mecanismo regulatorio directo en la progresión del ciclo celular después del daño del ADN. Referencias relacionadas: PMID:16818604
• La localización subcelular incluye el núcleo, el cromosoma y el citoplasma, con un transporte dinámico que depende de la etapa del ciclo celular y las señales de daño del ADN.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación (p. ej., en S988), la acetilación y la ubiquitinación, que modulan su actividad e interacciones.
• Las isoformas 1 y 3 se expresan ampliamente; la isoforma 3 a menudo se reduce o está ausente en líneas celulares de cáncer de mama y ovario.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor de la S988 de BRCA1 humana; la especificidad del anticuerpo para la forma fosforilada debe confirmarse mediante tratamiento con fosfatasa o ensayos de competencia.
• Para IHC-P, optimice la recuperación de antígenos y considere el uso de tejidos con expresión conocida de BRCA1 (p. ej., mama, ovario); incluya un control negativo utilizando un péptido de bloqueo no fosforilado.
• En IF/ICC, la tinción simultánea con marcadores de daño del ADN o marcadores de fase del ciclo celular puede proporcionar un contexto funcional para la localización de BRCA1.
• La detección por ELISA de fosfo-BRCA1 puede requerir una extracción cuidadosa y la normalización a los niveles totales de BRCA1; valide la linealidad y la sensibilidad en la matriz de muestra relevante.

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