Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-BRD4 (Ser1070) para WB, ELISA - O60885

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de BRD4

• BRD4 (proteína 4 que contiene bromodominio), también conocida como HUNK1, es un lector de cromatina que se une a histonas acetiladas y transmite la memoria epigenética a lo largo de las divisiones celulares. Permanece asociado a la cromatina durante todo el ciclo celular, ayudando a mantener la estructura de la cromatina y permitiendo la transcripción postmitótica (PubMed:20871596, PubMed:23086925, PubMed:23317504, PubMed:22334664, PubMed:23589332). Referencias relacionadas: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504 PMID:22334664 PMID:23589332

• Recluta el complejo P-TEFb a promotores y potenciadores, promoviendo la fosforilación del dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II en Ser2 y facilitando la elongación transcripcional. JMJD6 colabora con BRD4 para desplazar reguladores negativos como HEXIM1 y el ARNsn 7SK (PubMed:16109376, PubMed:16109377, PubMed:19596240). Referencias relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• BRD4 reconoce a RELA acetilado, lo que conduce al reclutamiento de P-TEFb y la activación de la señalización de NF-kappa-B (PubMed:19103749). Referencias relacionadas: PMID:19103749

• Tras la fosforilación por CK2, BRD4 es reclutado a los promotores diana de p53/TP53 y regula la transcripción mediada por p53 (PubMed:23317504). Referencias relacionadas: PMID:23317504

• En la respuesta al daño del ADN, BRD4 funciona como aislante de cromatina al reclutar el complejo condensina-2 a las histonas acetiladas, limitando la propagación de la fosforilación de H2AX y modulando la señalización.

• BRD4 se localiza predominantemente en el núcleo y los cromosomas, lo que coincide con su papel en la regulación de la cromatina. Se expresa de forma ubicua y sufre diversas modificaciones postraduccionales, entre ellas la fosforilación y la acetilación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para mantener la fosforilación de BRD4 en Ser1070 durante la preparación de muestras, añada inhibidores de fosfatasas a los tampones de lisis y evite incubaciones prolongadas a temperatura ambiente.
• Para western blotting (WB), el peso molecular predicho de BRD4 es de 152 kDa; confirme la identidad de la banda usando controles positivos y negativos adecuados (por ejemplo, lisados tratados con fosfatasa).
• Los experimentos de ELISA deben incluir controles de péptido fosforilado y no fosforilado para verificar la especificidad del anticuerpo por el epitopo fosforilado.
• Optimice la dilución del anticuerpo y las condiciones de incubación de forma empírica; las diluciones iniciales típicas para WB oscilan entre 1:500 y 1:2000.

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