Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-Camk2-T286 para WB - Q13554 / Q13557 / Q13555 / Q9UQM7

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Camk2 (CaMKII)

• CaMKII es una serina/treonina-proteína quinasa que funciona como un complejo holoenzimático, donde la subunidad beta (CAMK2B) desempeña un papel clave en el desarrollo y la plasticidad neuronal (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Referencias relacionadas: PMID:16690701, PMID:29100089
• En las neuronas, CaMKII beta presenta una función estructural independiente de la quinasa al unirse y agrupar filamentos de actina, esencial para la morfogénesis de las espinas dendríticas y la plasticidad sináptica (PubMed:29100089). Referencias relacionadas: PMID:29100089
• La autofosforilación de CaMKII (incluido en Thr286 en muchas isoformas) tras la unión de Ca2+/calmodulina genera una actividad quinasa autónoma independiente de Ca2+, crítica para la potenciación a largo plazo (LTP) y el aprendizaje dependiente del hipocampo (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Referencias relacionadas: PMID:16690701, PMID:29100089
• En el músculo esquelético, CaMKII beta regula el transporte de Ca2+ por el retículo sarcoplásmico al fosforilar la triadina y el fosfolambán, modulando la función muscular en respuesta al ejercicio (PubMed:16690701). Referencias relacionadas: PMID:16690701
• En condiciones de estrés del RE, CaMKII beta fosforila el regulador de la reticulofagia RETREG1 en Ser-151, promoviendo su oligomerización y actividad de escisión de membrana para la reticulofagia (PubMed:31930741). Referencias relacionadas: PMID:31930741
• La proteína se localiza en múltiples compartimentos celulares, incluyendo el citoplasma, citoesqueleto, centrosoma, membrana del retículo sarcoplásmico y sinapsis, lo que refleja sus diversas funciones.
• CaMKII beta se expresa ampliamente, con niveles altos en el cerebro fetal y adulto y en el músculo esquelético, lo que concuerda con sus funciones en la neurogénesis y la fisiología muscular.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor de T286 de la Camk2 humana; este sitio está conservado en las isoformas CAMK2A/B/G/D y en el ratón, lo que sustenta la reactividad cruzada observada. Se recomienda validar el anticuerpo en lisados de cerebro o músculo de ratón.
• Para la transferencia Western, se espera una banda de aproximadamente 54 kDa correspondiente a la Camk2 fosforilada. Incluya controles de carga adecuados y, si es posible, una muestra tratada con fosfatasa para confirmar la especificidad por la fosforilación.
• En ELISA, utilice el fosfopéptido como antígeno de recubrimiento y el péptido no fosforilado correspondiente como control negativo para evaluar la especificidad.
• Dado que el anticuerpo reconoce una fosforilación dependiente de la activación, optimice las condiciones de estimulación (por ejemplo, tratamiento con ionóforo de Ca2+ o neurotransmisores) para una detección robusta en modelos celulares.
• Determine la dilución de trabajo óptima para cada aplicación de forma experimental; las diluciones iniciales recomendadas son típicamente de 1:500–1:2000 para WB.

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