Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-CDK2-T160 para WB, IHC-P, ELISA - P24941

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDK2

• CDK2 (quinasa dependiente de ciclina 2) es una serina/treonina proteína quinasa que desempeña un papel central en la regulación del ciclo celular, particularmente en la transición G1-S y la progresión de la fase S. Fosforila sustratos críticos como RB1, p53/TP53, NPM1 y BRCA2 para promover la síntesis de ADN, la duplicación del centrosoma y programas de transcripción. CDK2 es esencial para la meiosis pero prescindible para la mitosis. Referencias relacionadas: PMID:10499802 PMID:10884347 PMID:10995386 PMID:11051553

• La actividad quinasa de CDK2 está estrictamente controlada por la unión a ciclinas y la fosforilación. Los complejos ciclina E/CDK2 impulsan la transición G1-S, mientras que los complejos ciclina A/CDK2 propulsan la progresión S-G2. La activación completa requiere la fosforilación en Thr-160 dentro del bucle T por el complejo quinasa activadora de CDK (CAK). Referencias relacionadas: PMID:18372919 PMID:19238148 PMID:19561645

• CDK2 se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluyendo el núcleo, el centrosoma, el cuerpo de Cajal, el citoplasma, el citoesqueleto y el endosoma, lo que refleja sus diversas funciones en la coordinación del ciclo celular, la reparación del ADN y la señalización.

• CDK2 participa en la respuesta al daño del ADN y vías de reparación. Fosforila BRCA2 para regular la reparación por recombinación homóloga y fosforila NBN para influir en el mantenimiento de los telómeros, contribuyendo así a la estabilidad genómica. Referencias relacionadas: PMID:15800615 PMID:20195506 PMID:21319273 PMID:28216226

• CDK2 fosforila la histona metiltransferasa EZH2, promoviendo el mantenimiento de las marcas epigenéticas H3K27me3 y el silenciamiento génico. Esto destaca el papel de CDK2 en la regulación epigenética. Referencias relacionadas: PMID:20935635

• Las modificaciones postraduccionales de CDK2, como la fosforilación, acetilación y S-nitrosilación, modulan su actividad y estabilidad. CDK2 es miembro de la superfamilia de proteínas quinasas, que presenta dominios de unión a ATP y a metales. Referencias relacionadas: PMID:20079829

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo reconoce específicamente CDK2 fosforilado en Thr-160. Para preservar la fosforilación durante la preparación de la muestra, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y evite incubaciones prolongadas a temperatura ambiente.
• Para Western blot, se esperan bandas aproximadamente a 30 kDa y 34 kDa (correspondientes a isoformas de CDK2 o cambios inducidos por fosforilación). Use lisatos tratados con λ-fosfatasa como control negativo y extractos de células enriquecidas en fase S como control positivo.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), los métodos de recuperación de antígenos deben optimizarse para retener epítopos fosforilados. Valide la especificidad de la tinción comparándola con la tinción de CDK2 total o utilizando ensayos de competencia con péptidos.
• Para aplicaciones ELISA, el anticuerpo puede servir como reactivo de captura o detección; titule cuidadosamente y confirme la linealidad para la detección cuantitativa de fosfo-CDK2-T160.

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