Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-Chk1 (S317) para WB, ELISA - O14757

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Chk1

• Proteína quinasa serina/treonina (gen CHEK1) que existe como dos isoformas: la quinasa de longitud completa (isoforma 1) y una isoforma represora endógena que antagoniza a CHK1 para promover la transición de S a G2/M.
• Necesaria para la detención del ciclo celular mediada por puntos de control y la activación de la reparación del ADN en respuesta a daño en el ADN o ADN no replicado. Referencias relacionadas: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Fosforila las fosfatasas de la familia CDC25 (CDC25A, CDC25B, CDC25C) para crear sitios de unión a 14-3-3 e inhibir su actividad, evitando así la activación de CDK-ciclina y bloqueando la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511
• Marca a CDC25A para degradación proteosomal al fosforilar múltiples residuos de serina (Ser-76, Ser-124, Ser-178, Ser-279, Ser-293), con Ser-76 preparando para la poliubiquitinación mediada por NEK11. Referencias relacionadas: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:19734889 PMID:20090422 PMID:9278511
• Fosforila RAD51 en Thr-309, promoviendo su liberación de BRCA2 y mejorando la asociación a la cromatina para facilitar la reparación por recombinación homóloga. Referencias relacionadas: PMID:15665856
• Fosforila TP53 en múltiples sitios del extremo C-terminal, promoviendo la acetilación, activación transcripcional y detención del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Adicionalmente, fosforila FANCE (reparación de entrecruzamiento de ADN), TLK1 (ensamblaje de cromatina) y otros sustratos para coordinar el mantenimiento del genoma. Referencias relacionadas: PMID:17296736 PMID:12660173 PMID:12955071
• Se localiza en el núcleo, cromosomas, citoplasma y centrósomo; se expresa de manera ubicua con los niveles más altos en timo, testículo, intestino delgado y colon.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para confirmar la especificidad de fosforilación, trate las muestras con fosfatasa lambda o incluya un control de bloqueo con péptido no fosforilado.
• Para Western blot, estimule las células con agentes que dañan el ADN (por ejemplo, etopósido, UV o hidroxiurea) para inducir la fosforilación de Chk1 en S317 y mejorar la detección de la señal.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en las líneas celulares humanas y sistemas de ensayo relevantes, ya que no se ha documentado reactividad cruzada con otras especies.
• Para aplicaciones de ELISA, emplee controles positivos y negativos apropiados para garantizar la especificidad para el epítopo fosforilado.
• Considere optimizar la dilución del anticuerpo y las condiciones de incubación para su configuración experimental específica.

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