Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Phospho-Chk1-S345 para WB y ELISA - O14757

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Chk1

• Chk1 es una serina/treonina proteína quinasa esencial para el punto de control por daño en el ADN, requerida para la detención del ciclo celular y la activación de la reparación del ADN en respuesta a daños en el ADN o ADN no replicado. Referencias relacionadas: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Reconoce el motivo de consenso de sustrato [R-X-X-S/T] y fosforila a CDC25A, CDC25B y CDC25C, lo que conduce a su inhibición por unión a 14-3-3 y degradación por proteasoma, bloqueando así la actividad de CDK-ciclina y deteniendo la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351
• Chk1 sufre fosforilación en varios residuos, siendo Ser-345 un sitio clave para su activación en respuesta a daño en el ADN, mediando su actividad quinasa y sus funciones en el punto de control.
• Chk1 fosforila a RAD51 en Thr-309 para promover la reparación por recombinación homóloga. Referencias relacionadas: PMID:15665856
• Fosforila a TP53 en múltiples sitios, mejorando su estabilización y actividad transcripcional para inducir la detención del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Chk1 se localiza en el núcleo, los cromosomas y los centrosomas, lo que refleja su papel en procesos asociados a la cromatina y la regulación mitótica.
• Se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en timo, testículo, intestino delgado y colon.
• El empalme alternativo del gen CHEK1 produce una isoforma represora endógena que facilita la transición de la fase S a G2/M.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó usando un fosfopéptido sintético correspondiente al residuo Ser-345 fosforilado de Chk1 humana. Esto garantiza la especificidad por la forma activada y fosforilada de la quinasa.
• Para Western blot, se recomienda incluir inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar la señal de fosforilación. Valide la fosfoespecificidad tratando las muestras con lambda fosfatasa y observando la pérdida de señal.
• El anticuerpo ha sido probado para reacción con muestras de humano, ratón y rata; la reacción cruzada con otras especies debe validarse de forma individual.
• En ELISA, el anticuerpo puede ser adecuado para detectar Chk1 fosforilado en lisados celulares o ensayos basados en péptidos. Optimice las condiciones de recubrimiento y detección para su configuración experimental específica.
• Dado el papel fundamental de Chk1 en la respuesta a daño en el ADN, este anticuerpo es una herramienta útil para estudiar la señalización de puntos de control, la regulación del ciclo celular y la biología del cáncer.

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