Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-Chk2-T68 para WB, ELISA - O96017

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Chk2

• La quinasa serina/treonina-proteína Chk2 (CHEK2, CDS1, homólogo de RAD53) juega un papel crítico en la detención del ciclo celular mediada por puntos de control, la reparación del ADN y la apoptosis en respuesta a roturas de doble cadena del ADN.
• Actúa como un supresor de tumores; también regula negativamente la progresión del ciclo celular durante ciclos no perturbados y puede contribuir a la inestabilidad cromosómica cuando está ausente.
• Tras la activación, fosforila numerosos efectores preferentemente en la secuencia consenso [L-X-R-X-X-S/T].
  Referencias relacionadas: PMID:37943659
• Regula la detención del punto de control del ciclo celular fosforilando e inhibiendo las fosfatasas CDC25A, CDC25B y CDC25C, lo que lleva a la fosforilación inhibitoria en tirosina de los complejos CDK-ciclina.
• Promueve la reparación del ADN mediante la fosforilación de BRCA2 (mejorando la asociación de RAD51 con la cromatina) y estimulando la transcripción de genes de reparación del ADN a través de FOXM1.
• Media la apoptosis a través de la fosforilación de p53/TP53 en Ser-20, MDM4 y PML, así como a través de la transcripción dependiente de E2F1 de genes pro-apoptóticos.
• Bajo estrés oxidativo, fosforila TRIM32 en Ser-55 para promover la ubiquitinación de ATG7 y el ensamblaje de la autofagia.
  Referencias relacionadas: PMID:37943659
• Promueve la asociación CCAR2-SIRT1 y es necesario para la inhibición de SIRT1 mediada por CCAR2.
  Referencias relacionadas: PMID:25361978
• Se localiza predominantemente en el núcleo (nucleoplasma, cuerpos de PML); altamente expresado en testículo, bazo, colon y leucocitos de sangre periférica, con menor expresión en otros tejidos.
• Contiene dominios quinasa, de unión a ATP y de unión a nucleótidos; clasificado como una fosfoproteína con funciones en mitosis, regulación de la transcripción e interacción huésped-virus.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de T68, lo que sugiere especificidad para la forma fosforilada; utilice inhibidores de fosfatasas apropiados durante la preparación de la muestra para preservar las señales fosfo.
• Para Western blot, considere estimular células con agentes que dañan el ADN (p. ej., etopósido, irradiación) para inducir la fosforilación de Chk2 antes de la preparación del lisado.
• Valide el anticuerpo en muestras humanas; pueden aparecer bandas de fondo y es recomendable optimizar las condiciones de carga y detección.
• Para ELISA, el péptido fosforilado puede servir como antígeno de recubrimiento para confirmar la especificidad; se recomiendan controles negativos utilizando péptido no fosforilado.
• En WB se debe observar una banda esperada cerca de 61 kDa; bandas adicionales pueden reflejar variantes de empalme o modificaciones postraduccionales.

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