Anticuerpo Monoclonal Anti-Fosfo-eIF2α-S51 para WB, ELISA - P05198

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Contexto Biológico: Función y Localización de eIF2α

• La subunidad 1 del factor de iniciación de la traducción eucariota 2 (eIF2α) es un componente central del complejo heterotrimérico eIF2, también conocida como eIF-2-alfa, eIF-2A o eIF2-alfa. Junto con eIF2β y eIF2γ, organiza los pasos iniciales de la síntesis de proteínas dependiente de la cubierta. Referencias relacionadas: PMID:16289705
• Forma un complejo ternario con GTP y el ARN de transferencia iniciador de metionina, que luego se asocia con la subunidad ribosomal 40S, facilitando el reclutamiento de ARNm para formar un pre-complejo de iniciación 43S. La posterior hidrólisis de GTP y la liberación de eIF2-GDP permiten la formación del complejo 80S. Referencias relacionadas: PMID:16289705
• La fosforilación en la serina 51 (S51) por quinasas activadas por estrés (HRI, PKR, PERK, GCN2) convierte a eIF2α en un inhibidor global de la traducción, un evento central en la respuesta de estrés integrada (REI). Esto atenúa la síntesis general de proteínas al mismo tiempo que regula al alza ARNm selectivos como ATF4 y QRICH1, permitiendo la adaptación celular al estrés. Referencias relacionadas: PMID:19131336 PMID:33384352
• Más allá del control de la traducción, la eIF2α fosforilada promueve la mitofagia independiente de PRKN al trasladarse a la membrana externa mitocondrial tras el daño mitocondrial, proporcionando un vínculo directo entre la reprogramación traductora y el control de calidad organelar. Referencias relacionadas: PMID:38340717
• eIF2α se encuentra predominantemente en el citoplasma y puede concentrarse en gránulos de estrés en condiciones adversas. También se localiza en la superficie mitocondrial después de la fosforilación inducida por estrés y se ha detectado en el citosol.
• Esta proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación y acetilación, que ajustan con precisión su actividad, direccionamiento subcelular e interacciones.
• Como proteína altamente conservada, eIF2α se expresa en tejidos de humanos, ratones y ratas, lo que subraya su papel esencial en el control traductor y la gestión del estrés celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético que abarca la S51 de la eIF2α humana (NP_004085.1); por lo tanto, el anticuerpo está diseñado para reconocer la forma fosforilada. Es posible que no detecte la eIF2α no fosforilada.
• Para transferencia Western, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis e incubación para preservar la señal de fosforilación de S51. Verifique la especificidad del anticuerpo tratando las muestras con λ-fosfatasa o fosfatasa intestinal de ternero antes del análisis.
• Debido a que la fosforilación de eIF2α suele ser rápida y transitoria en condiciones de estrés, optimice el tiempo de preparación de muestras y los protocolos de inducción de estrés (por ejemplo, inanición sérica, estrés del retículo endoplásmico o deprivación de aminoácidos) en el sistema celular o tisular correspondiente.
• Para aplicaciones de ELISA, considere usar un par de captura/detección que diferencie entre eIF2α total y fosfo-eIF2α si se requiere la cuantificación simultánea de ambas formas; valide el ensayo con controles positivos y negativos adecuados.

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