Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-eNOS (S1177) para WB, ELISA - P29474

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eNOS

• La eNOS (Óxido nítrico sintasa 3) cataliza la producción de óxido nítrico (NO), que actúa como vasodilatador a través de la relajación del músculo liso mediada por cGMP. Referencias relacionadas: PMID:1378832
• El NO producido por la eNOS también es fundamental para la angiogénesis mediada por VEGF y la activación plaquetaria, vinculando la función endotelial con la salud circulatoria.
• El empalme alternativo genera una isoforma dominante negativa que puede heterodimerizar con la enzima de longitud completa, potencialmente regulando a la baja la actividad de la eNOS.
• La eNOS se localiza en las caveolas de la membrana plasmática, el aparato de Golgi y el citoesqueleto, permitiendo una señalización de NO compartimentalizada.
• La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación en Ser1177 (asociada con la activación), miristoilación y palmitoilación, que regulan su localización subcelular y actividad.
• La expresión de eNOS se detecta en plaquetas, placenta, hígado y riñón, siendo las células endoteliales vasculares un sitio primario de función.
• La enzima requiere múltiples cofactores: hemo, FAD, FMN, NADPH y zinc, y se une a la calmodulina de manera dependiente de calcio para su activación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a la región Ser1177, lo que sugiere que el anticuerpo reconoce la forma fosforilada de eNOS en este sitio.
• Para Western blot, considere usar inhibidores de fosfatasa en los tampones de lisis para preservar la fosforilación y validar la especificidad de la banda usando controles tratados con fosfatasa.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir optimización de las condiciones de recubrimiento y detección; considere probar un rango de diluciones de anticuerpo y agentes bloqueantes.
• Valide la especificidad en lisados de células o tejidos humanos relevantes, ya que no se indica reactividad cruzada con otras especies; incluya controles positivos y negativos apropiados.

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