Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-FLT3-Y589/591 para WB, ELISA - P36888

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de FLT3

• FLT3 (tirosina quinasa 3 similar a Fms), también designado FLK2, STK1 y CD135, es una tirosina-proteína quinasa de tipo receptor que se une a FLT3LG para regular la diferenciación, proliferación y supervivencia de las células progenitoras hematopoyéticas y las células dendríticas.
• La señalización descendiente incluye la fosforilación de SHC1 y AKT1, la activación de MTOR, la cascada RAS/MAPK (MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1) y las proteínas STAT5, aunque el FLT3 de tipo silvestre induce solo una activación marginal de STAT5.
• FLT3 se encuentra en la membrana celular y dentro de la luz del retículo endoplasmático.
• La expresión se detecta en la médula ósea, células madre hematopoyéticas, células progenitoras mieloides y de granulocitos/macrófagos; adicionalmente en hígado, timo, bazo, ganglio linfático, riñón y páncreas, con niveles altos en la leucemia de células T.
• Las mutaciones que causan actividad constitutiva de la quinasa impulsan la proliferación celular y la resistencia a la apoptosis a través de múltiples vías, destacando a FLT3 como un protooncogén y una variante clave de la enfermedad en la leucemia mieloide aguda.
• Como glucoproteína y fosfoproteína, FLT3 sufre empalme alternativo y está sujeta a conjugación de ubiquitina; también juega un papel en las interacciones huésped-virus.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Debido a que este anticuerpo se dirige a sitios de fosforilación, utilice tampones de lisis suplementados con inhibidores de fosfatasas para preservar el epítopo fosforilado durante la preparación de muestras para Western blot.
• Considere estimular células que expresan FLT3 (por ejemplo, líneas de leucemia) con ligando de FLT3, o tratar con inhibidores de quinasas, para confirmar la detección específica de la fosforilación.
• Para ELISA, el fosfopéptido inmunógeno puede servir como control positivo; las condiciones de recubrimiento de placas y detección pueden requerir optimización.
• Valide la especificidad del anticuerpo comparando señales de lisados de tipo silvestre y tratados con fosfatasa o utilizando mutagénesis dirigida al sitio de Y589/Y591.

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