Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-FOXO1-T24/FOXO3A-T32/FOXO4-T28 para WB, IHC-P, ELISA - Q12778 / O43524 / P98177

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de FOXO1/FOXO3A/FOXO4

• FOXO1 (Forkhead box O1) es un factor de transcripción y miembro clave de la familia FOXO, que también incluye a FOXO3A y FOXO4; los tres son objetivos de este anticuerpo.
• FOXO1 es el mediador principal de la señalización por insulina, se une al elemento de respuesta a la insulina (IRE) para regular la homeostasis metabólica y el equilibrio redox en respuesta al estrés oxidativo. Referencias relacionadas: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• En hepatocitos, FOXO1 promueve la gluconeogénesis al activar genes como G6PC1 y PCK1, trabajando en conjunto con coactivadores como PPARGC1A. Referencias relacionadas: PMID:17024043
• FOXO1 es un regulador crítico de la muerte celular programada, funciona aguas abajo de quinasas (por ejemplo, AKT1, STK4) y promueve la apoptosis en neuronas, células del músculo liso cardíaco y células endoteliales. Referencias relacionadas: PMID:18356527 PMID:19221179 PMID:19483080 PMID:31063815
• Bajo condiciones de ayuno o estrés oxidativo, FOXO1 induce la autofagia de una manera independiente de la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:20543840
• FOXO1 se traslada dinámicamente entre el citoplasma y el núcleo; su localización subcelular y actividad transcripcional están estrictamente controladas por modificaciones postraduccionales, especialmente la fosforilación en Thr-24 (y sitios análogos en FOXO3A/FOXO4) por AKT, que induce su exclusión nuclear.
• FOXO1 se expresa abundantemente en el músculo esquelético y el ovario, con niveles moderados en corazón, placenta, pulmón, hígado, páncreas y otros tejidos; también se detecta en células endoteliales. Referencias relacionadas: PMID:9479491 PMID:19483080

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se obtuvo a partir de un fosfopéptido sintético correspondiente a la región de Thr-24 de FOXO1 humano. Basado en la homología de secuencia, se predice que también reconoce la Thr-32 fosforilada de FOXO3A y la Thr-28 fosforilada de FOXO4.
• Para el análisis por Western blot, incluya inhibidores de fosfatasas en el buffer de lisis para preservar la señal de fosforilación. Se espera una banda cerca de 70 kDa para FOXO1, con tamaños similares para FOXO3A y FOXO4.
• Al realizar inmunohistoquímica (IHC-P), considere validar la tinción en tejidos que se sabe expresan FOXO1 (por ejemplo, músculo esquelético, hígado) y utilizar un control desfosforilado para confirmar la especificidad por la forma fosforilada.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del uso del péptido inmunógeno como control positivo para evaluar la sensibilidad de detección.
• Como ocurre con todos los anticuerpos específicos para formas fosforiladas, la preabsorción del anticuerpo con el péptido no fosforilado se puede utilizar para verificar la especificidad.

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