Anti-Fosfo-Histona H2A-S129 Conejo pAb - P04911

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H2A.1

• La Histona H2A.1 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Los nucleosomas enrollan y compactan el ADN, regulando así su accesibilidad para la transcripción, replicación, reparación y estabilidad cromosómica.
• Esta histona está críticamente involucrada en la respuesta al daño del ADN, particularmente en la reparación de roturas de doble cadena (DSB) mediante vías de recombinación homóloga y unión de extremos no homólogos.
• Las modificaciones postraduccionales de la Histona H2A.1, como la fosforilación en Ser129 (equivalente a la S139 de H2AX de mamíferos), acetilación, metilación y ubiquitinación, forman un código de histonas que modula la estructura de la cromatina y recluta proteínas de reparación a los sitios de daño.
• La proteína se localiza exclusivamente en el núcleo y está asociada con los cromosomas a lo largo del ciclo celular.
• La Histona H2A.1 de S. cerevisiae está codificada por el gen HTA1 y pertenece a la familia de histonas H2A, que incluye variantes altamente conservadas en eucariotas.
• Las palabras clave asociadas con P04911 incluyen daño del ADN, reparación del ADN, fosfoproteína, núcleo del nucleosoma y conjugación Ubl, subrayando sus roles clave en el mantenimiento del genoma.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a la Ser129 fosforilada de la Histona H2A de levadura. Por lo tanto, el anticuerpo reconoce específicamente la forma fosforilada; asegúrese de que las condiciones experimentales preserven el estado de fosforilación (por ejemplo, use inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra).
• Para IHC-P, los métodos de recuperación de antígeno y los protocolos de fijación de tejidos deben optimizarse para epítopos fosforilados. Considere probar anhidrido citracónico o recuperación de epítopo inducida por calor en tampón citrato (pH 6.0) si los métodos estándar producen una tinción débil.
• En ELISA, el anticuerpo puede usarse para la detección de péptidos o proteínas H2A fosforiladas. Verifique la reactividad cruzada con el objetivo endógeno en la especie relevante (humano, rata) incluyendo controles apropiados y bloqueando con péptidos no fosforilados.
• Aunque el inmunógeno se deriva de levadura, se reporta reactividad cruzada para humano y rata. Sin embargo, la alineación de secuencias revela que la región alrededor de la Ser129 está altamente conservada en eucariotas superiores; aún así, se recomienda la validación en el sistema de muestra específico.

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