Anticuerpo Policlonal Anti-Fosfo-Histona H3-S10 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16695 / P68431

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3.1t (H3.4)

• La Histona H3.1t (también conocida como H3.4, H3/g, codificada por el gen H3-4/HIST3H3) es una variante de histona core específica del testículo que reemplaza a la histona H3 canónica en los nucleosomas durante la espermatogénesis.
• Como componente principal del nucleosoma, la Histona H3.1t envuelve y compacta el ADN en cromatina, limitando la accesibilidad a las maquinarias de transcripción, reparación y replicación.
• La familia de genes H3 incluye múltiples variantes dependientes de la replicación (como HIST1H3 y HIST2H3) e independientes de la replicación (H3.3), siendo H3.1t un miembro específico de tejido.
• La Histona H3.1t se localiza en el núcleo y es un componente de la cromatina cromosómica, donde sufre extensas modificaciones postraduccionales (MPT) que incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, denominadas colectivamente el código de histonas.
• La fosforilación de la Histona H3 en la Serina 10 (H3S10ph) es un marcador mitótico clave, asociado a la condensación cromosómica, y también participa en la activación transcripcional de genes de respuesta inmediata.
• La especificidad tisular de H3.1t para las células testiculares sugiere una función especializada en la remodelación de la cromatina durante la espermatogénesis, contribuyendo potencialmente a la fertilidad masculina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un fosfopéptido sintético correspondiente a la Ser10 de la Histona H3 humana. Para garantizar una detección específica de fosforilación, considere usar lisados celulares tratados con fosfatasa o no estimulados como controles negativos en Western blotting.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), pueden ser necesarios pasos de permeabilización y recuperación de antígeno; optimice las condiciones de fijación y bloqueo para preservar el epítopo fosforilado.
• La amplia reactividad cruzada entre especies predicha sugiere que el anticuerpo puede detectar fosfo-H3-S10 en todos los vertebrados; sin embargo, se recomienda la validación con muestras de control positivo y negativo para cada especie.
• Dado el pequeño peso molecular de la Histona H3 (~15 kDa), utilice geles de SDS-PAGE de alto porcentaje (por ejemplo, 15%) y tamaños de poro de membrana apropiados (0,2 µm) para una transferencia y detección eficientes.
• En aplicaciones de ELISA e IF, valore el anticuerpo para determinar la dilución de trabajo óptima, ya que las concentraciones absolutas no se han determinado empíricamente para este producto.

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