Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-Histona H3-S28 para WB, IP, ELISA - Q16695 / P68431

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3 (Fosfo-S28)

• La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad básica de la cromatina, y juega un papel fundamental en la compactación del ADN y la regulación de su accesibilidad.
• Existen múltiples variantes de H3; Q16695 codifica la Histona H3.1t específica de testículo (también conocida como H3/g, H3.4), pero el producto puede reconocer otras variantes de H3, incluida la H3.1 (P68431), debido a la alta conservación de secuencia.
• Como parte del nucleosoma, H3 contribuye a procesos nucleares esenciales como la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica.
• La Histona H3 está sujeta a una compleja gama de modificaciones postraduccionales (MPTs), denominadas colectivamente el código de histonas, que modulan la estructura y función de la cromatina. Las MPTs clave incluyen acetilación, metilación, fosforilación, ubiquitinación, entre otras.
• La fosforilación en la Serina 28 (S28) es parte del código de histonas y está implicada en la dinámica de la cromatina, influyendo en la mitosis y la activación génica.
• La localización subcelular se restringe al núcleo y está asociada a los cromosomas, en consonancia con su función unida a la cromatina.
• La H3.1t muestra expresión específica de tejido en células testiculares, lo que sugiere funciones especializadas en la espermatogénesis o en el remodelado de la cromatina durante el desarrollo de las células germinales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido sintético fosforilado alrededor de la S28; por lo tanto, se espera que detecte específicamente la forma fosforilada de la Histona H3. Para preservar la fosforilación durante la preparación de la muestra, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular predicho es de ~15 kDa, y se debe observar una banda nítida. Considere usar extractos nucleares o histonas extraídas con ácido para una detección enriquecida.
• En inmunoprecipitación (IP), el formato monoclonal de conejo proporciona alta afinidad y especificidad; valide las condiciones de unión y elución empíricamente en su muestra objetivo.
• Para ELISA, el péptido fosforilado puede usarse como control positivo; optimice las condiciones de recubrimiento y detección para minimizar la reactividad cruzada con péptidos no fosforilados.
• Se predice reactividad cruzada para una amplia gama de especies basándose en la conservación de secuencia; sin embargo, verifique siempre con los controles específicos de especie apropiados.

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