Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-HSL-S563 para WB, ELISA - Q05469

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Lipasa Sensible a Hormonas

• La lipasa sensible a hormonas (HSL), codificada por el gen LIPE, es una lipasa multifuncional con una amplia especificidad de sustrato, que hidroliza triacilgliceroles, diacilgliceroles, monoacilgliceroles, ésteres de colesterol y ésteres de retinilo (PubMed:15716583, PubMed:15955102, PubMed:19800417).
  Referencias relacionadas:
  PMID:15716583
  PMID:15955102
  PMID:19800417

• La HSL hidroliza preferentemente diacilgliceroles sobre triacilgliceroles y monoacilgliceroles, con preferencia por la posición sn-3 del esqueleto de glicerol en los diacilgliceroles.

• En el tejido adiposo y el corazón, la HSL moviliza principalmente los triglicéridos almacenados en ácidos grasos libres para obtener energía, mientras que en los tejidos esteroidogénicos, convierte los ésteres de colesterol en colesterol libre para la producción de hormonas esteroideas.

• La HSL también cataliza la hidrólisis del 2-aracodonoilglicerol, un endocannabinoide, y el 2-acetil monoalquilglicerol éter, un precursor en la síntesis del factor activador de plaquetas.

• A nivel subcelular, la HSL se localiza en el citosol, las gotas de lípidos y la membrana celular, incluidas las caveolas; su translocación está regulada por fosforilación.

• La HSL es una fosfoproteína, y su actividad y localización intracelular se modulan mediante la fosforilación en múltiples residuos; este anticuerpo detecta específicamente la HSL fosforilada en la serina 563.

• La proteína se expresa altamente en los testículos, pero también está presente en el tejido adiposo, el corazón y los tejidos esteroidogénicos, lo que refleja sus roles clave en la homeostasis energética y la esteroidogénesis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado correspondiente a la Ser563 de la HSL de rata; verifique la alineación de secuencias con la HSL humana, de ratón y rata para garantizar la reactividad cruzada.

• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho de la HSL es de aproximadamente 117 kDa; considere el uso de un porcentaje de gel apropiado y condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.

• Valide la especificidad del anticuerpo tratando las muestras con fosfatasa o utilizando controles de péptidos no fosforilados.

• Para ELISA, optimice las condiciones de recubrimiento e incluya un estándar de péptido fosfo para cuantificar los niveles de fosforilación.

• Use condiciones de estimulación apropiadas (p. ej., isoproterenol para adipocitos) para inducir la fosforilación de la HSL en Ser563 antes de la detección.

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