Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-IκBα fosforilada (Ser32) para WB, ELISA - P25963

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de IκBα

• El inhibidor alfa de NF-κB (IκBα) es un regulador clave de los factores de transcripción NF-κB, codificado por el gen NFKBIA. También se conoce como I-kappa-B-alpha, IkB-alfa y MAD3.
• IκBα ejerce su función al unirse a dímeros de NF-κB (como RELA/p65 y NFKB1/p50) en el citoplasma, enmascarando sus señales de localización nuclear y evitando su translocación al núcleo. Referencias relacionadas: PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976
• Después de una estimulación proinflamatoria o inmune, IκBα se fosforila en los residuos de serina 32 y 36, lo que conduce a su ubiquitinación y degradación por el proteasoma, liberando a NF-κB para que se transloca al núcleo y active la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813
• IκBα se localiza predominantemente en el citoplasma, pero puede trasladarse al núcleo, donde también puede inhibir la unión de NF-κB al ADN o mediar la terminación de la respuesta de NF-κB.
• La fosforilación en Ser32 es un evento crítico en la vía canónica de señalización de NF-κB, por lo que es un biomarcador muy estudiado para la activación de esta vía.
• Palabras clave de UniProt indican que IκBα es una fosfoproteína, sufre ubiquitinación y participa en las interacciones huésped-virus, lo que resalta su papel central en la señalización inmune y la enfermedad.
• La proteína tiene un peso molecular aproximado de 35,6 kDa (calculado) y contiene dominios de repetición anquirina que median las interacciones con NF-κB.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a la región de Ser32 de la IκBα humana; por lo tanto, el anticuerpo reconoce específicamente la forma fosforilada. Incluya siempre inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para Western blot para preservar la señal de fosforilación.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección para cuantificar IκBα fosforilada en lisados de células o tejidos; considere emparejarlo con un anticuerpo contra IκBα total para la normalización.
• Confirme la especificidad del anticuerpo en su sistema tratando las muestras con lambda fosfatasa o usando un péptido no fosforilado como competidor.
• Se informa reactividad cruzada para humano, ratón y rata. Valide las reactividades en las especies correspondientes antes de realizar experimentos a gran escala, ya que la conservación del epítopo puede variar.

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