Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-IκBα (Ser36) para WB y ELISA - P25963

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de IκBα (Inhibidor alfa de NF-κB)

• IκBα (inhibidor alfa de NF-κB), codificado por el gen NFKBIA, es un regulador crítico de la vía de señalización de NF-κB, cuya función principal es retener a los dímeros de NF-κB en el citoplasma.
  Referencias relacionadas:
  PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976

• Tras la estimulación por citoquinas o patógenos, IκBα se fosforila en los residuos de serina 32 y 36, lo que lo marca para poliubiquitinación y degradación proteosomal, permitiendo la translocación nuclear de NF-κB y la activación génica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813

• La proteína contiene múltiples repeticiones anquirina que median su interacción con las subunidades p65 y p50 de NF-κB, enmascarando sus señales de localización nuclear.

• IκBα se desplaza entre el citoplasma y el núcleo; puede entrar al núcleo para eliminar a NF-κB del ADN y volver a secuestrarlo en el citoplasma, asegurando respuestas transcripcionales transitorias.

• Modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, ubiquitinación, hidroxilación y formación de enlaces isopeptídicos, regulan estrechamente la estabilidad y función de IκBα.

• Las mutaciones en NFKBIA se asocian con displasia ectodérmica con inmunodeficiencia (EDA-ID), subrayando su papel esencial en el desarrollo y homeostasis del sistema inmunológico.

• Los patógenos virales a menudo se dirigen a IκBα para modular la señalización de NF-κB, destacando su participación en las interacciones huésped-virus.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado sintético correspondiente a Ser36 de IκBα humano; es probable que detecte específicamente a IκBα solo cuando está fosforilado en este residuo. Se recomienda validar la especificidad fosfo mediante tratamiento con fosfatasa o competición con péptido no fosforilado.
• Para Western blot, estimule las células (por ejemplo, con TNF-α o IL-1β) para inducir una fosforilación robusta de IκBα. Puede ser necesario un experimento de curso temporal para capturar la naturaleza transitoria de esta modificación.
• Basándose en la similitud de secuencia, se espera que el anticuerpo reaccione de forma cruzada con fosfo-IκBα de ratón y rata. Sin embargo, se recomienda verificar la alineación de la secuencia peptídica alrededor de Ser36 en estas especies.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección en un formato de ELISA tipo sándwich. Optimice las condiciones de recubrimiento y detección empíricamente.
• Evite ciclos repetidos de congelación-descongelación; almacene el anticuerpo a -20°C al recibirlo para mantener su actividad.

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