Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-IRF3-S396 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14653

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IRF3

• El factor regulador del interferón 3 (IRF3) es un regulador transcripcional clave de las respuestas inmunes dependientes de interferón tipo I (IFN), esencial para la defensa innata contra virus de ADN y ARN.
• Tras una infección viral o señalización del receptor tipo Toll (TLR), IRF3 es fosforilado por las quinasas IKBKE y TBK1, lo que promueve su dimerización, translocación nuclear y asociación con CREBBP para formar el complejo factor 1 activado por ARNdc (DRAF1) que activa la transcripción de IFN-alfa/beta y ISG.
  Referencias relacionadas:
  PMID:22394562
  PMID:25636800
  PMID:27302953
  PMID:16154084
  PMID:33440148
• Se une a elementos de respuesta estimulados por interferón (ISRE) en los promotores de genes, actuando como un activador más potente de IFNB que de IFNA y contribuyendo tanto a las fases de inducción temprana como tardía del IFN.
  Referencias relacionadas:
  PMID:11846977
  PMID:16846591
  PMID:16979567
  PMID:20049431
• En respuesta a la infección por el virus Sendai, IRF3 es reclutado a las mitocondrias a través de TOMM70:HSP90AA1, donde desencadena la apoptosis mediante la activación de BAX en macrófagos primarios.
  Referencias relacionadas:
  PMID:25609812
• IRF3 es un mediador crucial de la respuesta de IFN durante la infección por SARS-CoV-2, destacando su papel en la defensa antiviral contra patógenos emergentes.
  Referencias relacionadas:
  PMID:33440148
• Subcelularmente, IRF3 se localiza predominantemente en el citoplasma en su estado inactivo, translocándose al núcleo tras la activación, y también se asocia con mitocondrias para regular la apoptosis.
• Se expresa constitutivamente en una amplia gama de tejidos, subrayando su papel basal en la vigilancia inmunitaria innata.
• La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación, que controlan estrechamente su actividad y estabilidad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blotting, espere una banda de aproximadamente 47kDa. Valide la especificidad para la forma fosforilada tratando muestras con fosfatasa lambda o utilizando un control de bloqueo con péptido no fosforilado.
• En experimentos de IF/ICC, se pueden usar estímulos como poli(I:C) o infección viral para inducir la translocación nuclear de IRF3, mejorando la detección de la forma fosforilada.
• El anticuerpo muestra reactividad cruzada con IRF3 de ratón; por lo tanto, considere usar líneas celulares derivadas de ratón o células primarias tratadas con agonistas de TLR apropiados para estudios funcionales.
• Para ELISA, optimice las concentraciones del antígeno de recubrimiento y las diluciones del anticuerpo secundario para garantizar la especificidad contra el epítopo fosforilado S396.

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