Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-Fosfo-IRS1-S612 para WB, IHC-P, ELISA - P35568

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IRS1

• El sustrato del receptor de insulina 1 (IRS1) es una proteína adaptadora de señalización que media la transducción de señales desde el receptor de insulina (INSR) y el receptor del factor de crecimiento similar a la insulina I (IGF1R), cumpliendo un papel fundamental en el desarrollo, el crecimiento, la homeostasis glucídica y el metabolismo lipídico. Referencias relacionadas: PMID:7541045, PMID:33991522, PMID:38625937, PMID:19639489
• Tras la fosforilación por el receptor de insulina, IRS1 funciona como un andamiaje de señalización que propaga la acción de la insulina al unirse a proteínas que contienen dominios SH2, incluyendo la subunidad reguladora p85 de PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 y SHP2. Referencias relacionadas: PMID:11171109, PMID:8265614
• El reclutamiento de GRB2 activa la vía Ras/Raf/MEK/MAPK, mientras que el reclutamiento de PI3K activa la vía PI3K/AKT, coordinando las respuestas metabólicas y mitogénicas.
• IRS1 actúa como regulador positivo de la vía de señalización Wnt/beta-catenina al suprimir la degradación de DVL2 mediada por autofagia, promoviendo así la proliferación celular. Referencias relacionadas: PMID:24616100
• La localización subcelular incluye el citoplasma y el núcleo.
• IRS1 sufre extensas modificaciones postraduccionales, que incluyen fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación. Este anticuerpo detecta específicamente la fosforilación en la serina 612, un sitio regulador en la señalización de IRS1.
• Las variaciones genéticas en IRS1 están asociadas a la susceptibilidad a la diabetes mellitus.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de S612; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca específicamente a IRS1 fosforilado en este sitio. Para Western Blot, se recomienda confirmar la fosfo-especificidad mediante tratamiento con fosfatasa lambda o ensayos de competición con péptido fosforilado.
• El peso molecular predicho de IRS1 es de aproximadamente 132 kDa. Al realizar WB, utilice un porcentaje de gel apropiado (por ejemplo, 8% de SDS-PAGE) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• La reactividad cruzada con ratón y rata sugiere una conservación de la secuencia del epitopo; sin embargo, se recomienda la validación en el sistema de muestra correspondiente.
• Para IHC-P, puede ser necesaria la recuperación de antígeno, y la adición de inhibidores de fosfatasa durante el procesamiento del tejido puede ayudar a preservar la fosforilación. La dilución y la incubación del anticuerpo primario deben optimizarse empíricamente.
• En aplicaciones de ELISA, se recomienda la adsorción del péptido fosforilado en la placa, y la detección se puede realizar mediante protocolos indirectos de ELISA estándar.

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