Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-JNK1-T183/Y185 + JNK2-T183/Y185 + JNK3-T221/Y223 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P45983/P45984/P53779

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de JNK1/2/3

• Miembro de la familia de las proteincinasas activadas por mitógenos (MAPK), también conocidas como proteincinasas activadas por estrés (SAPK), que incluye a JNK1 (MAPK8), JNK2 (MAPK9) y JNK3 (MAPK10).
• Se activa mediante fosforilación doble en el motivo Thr-Pro-Tyr (T183/Y185 en JNK1) a cargo de las quinasas corriente arriba MAP2K4/MKK4 y MAP2K7/MKK7 en respuesta a estímulos de estrés.
• Fosforila y regula factores de transcripción, especialmente c-Jun, ATF2 y ELK1, modulando así la actividad transcripcional de AP-1. Referencias relacionadas: PMID:18307971
• Participa en la proliferación celular, diferenciación, apoptosis y autofagia al dirigirse a proteínas clave como p53/TP53, BAD, BCL2 y BECN1. Referencias relacionadas: PMID:21364637 PMID:21095239 PMID:18570871
• La localización subcelular incluye citoplasma, núcleo y sinapsis; la translocación al núcleo ocurre después de la activación.
• Contribuye a la señalización inflamatoria al fosforilar NLRP3, promoviendo el ensamblaje del inflamasoma. Referencias relacionadas: PMID:28943315
• Regula el ritmo circadiano mediante la fosforilación del heterodímero CLOCK-BMAL1. Referencias relacionadas: PMID:22441692
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas (por ejemplo, JNK1 alfa y beta) con preferencias distintas de unión al sustrato.

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado que este anticuerpo reconoce epítopos dependientes de fosforilación, trate las muestras con inhibidores de fosfatasas durante la lisis y evite el almacenamiento prolongado a temperatura ambiente para preservar las señales de fosforilación.
• Para transferencia Western, se esperan bandas de aproximadamente 48-52 kDa correspondientes a JNK1/2; pueden observarse bandas adicionales para JNK3 en pesos moleculares similares; utilice controles positivos como células tratadas con UV o anisomicina.
• Para inmunoprecipitación (IF-P), los pasos de permeabilización y bloqueo son críticos; valide la tinción en líneas celulares estimuladas por estrés relevantes.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), considere la recuperación de antígeno con tampón de citrato (pH 6,0) y pruebe las diluciones del anticuerpo en tejidos que se sabe presentan activación de JNK, como aquellos en condiciones inflamatorias o apoptóticas.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; la reactividad cruzada con proteínas JNK no fosforiladas debe evaluarse mediante ensayos de competición con péptidos adecuados.

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