Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-JNK1/2/3 (T183/T183/T221) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45983 / P45984 / P53779

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de JNK1/JNK2/JNK3

• La proteína quinasa activada por mitógenos 8 (MAPK8/JNK1) es una serina/treonina-proteína quinasa perteneciente a la familia de las quinasas N-terminales de c-Jun (JNK), que también incluye a MAPK9/JNK2 y MAPK10/JNK3. Estas quinasas están codificadas por MAPK8, MAPK9 y MAPK10 respectivamente y comparten sitios de fosforilación conservados en el bucle de activación (Thr183 en JNK1/JNK2 y Thr221 en JNK3).
• JNK1 es un mediador central de la vía de señalización de la proteína quinasa activada por estrés (SAP/JNK), la cual es estimulada por citoquinas proinflamatorias y estrés físico. La JNK1 activada fosforila factores de transcripción que incluyen JUN, JDP2 y ATF2, regulando así la actividad transcripcional de AP-1 (PubMed:18307971).
  Referencias relacionadas:
  PMID:18307971
• JNK1 promueve la apoptosis al fosforilar p53/TP53 y YAP1 (PubMed:21364637). También favorece la supervivencia de células eritroides al fosforilar BAD tras la estimulación con EPO (PubMed:21095239) y media la autofagia inducida por inanición a través de la fosforilación de BCL2 (PubMed:18570871).
  Referencias relacionadas:
  PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• JNK1 fosforila una amplia gama de sustratos que incluyen CDT1 (PubMed:21856198), HSF4 (PubMed:16581800), SIRT1 (PubMed:17296730), ELK1, ITCH (PubMed:20027304), CLOCK-BMAL1 (PubMed:22441692), NLRP3 (PubMed:28943315) y SIRT6 (PubMed:27568560), implicándola en la replicación del ADN, el ritmo circadiano, la activación del inflamasoma y las respuestas al estrés celular.
  Referencias relacionadas:
  PMID:21856198, PMID:16581800, PMID:17296730, PMID:20027304, PMID:22441692, PMID:28943315, PMID:27568560
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas de JNK1 (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) con diferentes afinidades de unión para c-Jun y ATF2, aunque todas las isoformas fosforilan sustratos con eficiencia comparable.
• JNK1 se localiza en el citoplasma, el núcleo y las sinapsis, lo que le permite regular tanto la transcripción nuclear como eventos citoplasmáticos como la captura de vesículas sinápticas a través de la fosforilación de SYT4.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido fosfo-sintético alrededor de Thr183 de JNK1 humano. Este residuo del bucle de activación (Thr183 en JNK1/JNK2, Thr221 en JNK3) está conservado en los tres miembros de la familia JNK, lo que explica la multi-especificidad observada en las especificaciones.
• Para Western blot, utilice tampones de lisis suplementados con inhibidores de fosfatasas para preservar la señal de fosforilación. Los pesos moleculares predichos oscilan entre 35‑52 kDa, pero las posiciones reales de las bandas pueden variar debido a la expresión de isoformas y modificaciones postraduccionales; valídelo en el sistema de muestra relevante.
• En inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, la detección fosfo-específica puede requerir recuperación antigénica y una optimización cuidadosa de las condiciones de fijación/permeabilización. Incluya siempre un control no fosforilado o tratamiento con fosfatasa para verificar la especificidad de la señal.
• Para aplicaciones de ELISA, considere emparejar este anticuerpo con un anticuerpo de captura de JNK total para cuantificar los niveles de fosforilación en relación con la expresión total de proteína.

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