Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-LRRK2-S935 para WB y ELISA - Q5S007

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LRRK2

• LRRK2 (Proteína quinasa serina/treonina 2 con repeticiones ricas en leucina), también conocida como Dardarin o PARK8, es una gran proteína multidominio de 286 kDa perteneciente a la familia ROCO. Contiene repeticiones ricas en leucina, un dominio GTPasa Roc, un dominio COR, un dominio quinasa y repeticiones WD40.

• LRRK2 funciona como una quinasa serina/treonina y una GTPasa, fosforilando una amplia gama de sustratos involucrados en plasticidad neuronal, inmunidad innata, autofagia y tráfico de vesículas. Referencias relacionadas: PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• Es un regulador clave de las GTPasas RAB, fosforilando múltiples proteínas RAB (incluyendo RAB3, RAB8, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35 y RAB43) para controlar su asociación a membrana e interacciones con efectores, modulando así el tráfico de vesículas y la ciliogénesis. Referencias relacionadas: PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718

• LRRK2 regula positivamente la autofagia a través de una vía dependiente de calcio CAMKK/AMPK, y es reclutado a lisosomas sobrecargados donde fosforila RAB8A y RAB10 para promover la liberación del contenido lisosomal. Referencias relacionadas: PMID:22012985 PMID:30209220 PMID:38227290

• Actúa como un regulador positivo de la inmunidad innata al mediar la fosforilación de RIPK2 aguas abajo de NOD1 y NOD2, mejorando así la activación de RIPK2. Referencias relacionadas: PMID:27830463

• Se localiza en múltiples compartimentos celulares, incluyendo vesículas citoplasmáticas, membrana del aparato de Golgi, retículo endoplásmico, endosomas, lisosomas, membrana mitocondrial externa, vesículas sinápticas y proyecciones celulares como axones y dendritas.

• Altamente expresado en el cerebro, particularmente en neuronas piramidales, áreas dopaminoceptivas y la sustancia negra pars compacta; también se expresa en corazón, hígado, pulmón, riñón y células inmunes como neutrófilos. Referencias relacionadas: PMID:29127255

• Las mutaciones en LRRK2 son la causa genética más común de la enfermedad de Parkinson familiar, con variantes patogénicas agrupadas en los dominios GTPasa y quinasa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que este es un anticuerpo fosfo-específico (anti-fosfo-S935), asegúrese de incluir inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar las señales de fosforilación.
• Para WB, el alto peso molecular (286 kDa) requiere condiciones de separación adecuadas; considere usar geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje y tiempos de transferencia extendidos.
• Valide la especificidad comparando señales entre las formas fosforilada y no fosforilada; el bloqueo con péptido utilizando el péptido fosfo inmunizante puede confirmar la fosfo-especificidad.
• Se ha reportado reactividad cruzada con LRRK2 de ratón y rata (probablemente en el sitio fosfo equivalente); verifique la homología de secuencia del epítopo del inmunógeno en estas especies.
• Para ELISA, se pueden usar formatos típicos directos o sándwich; titre la concentración de anticuerpo en el sistema de muestra relevante.

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