Policlonal de conejo Anti-Fosfo-MET-Y1234/1235 para WB, ELISA - P08581

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MET

• MET, también conocido como receptor del factor de crecimiento hepatocelular (HGFR), protooncogén c-Met y receptor del factor de dispersión, es una receptor tirosina quinasa que transduce señales desde la matriz extracelular tras unirse a su ligando HGF. Regula procesos clave como la proliferación, dispersión, morfogénesis y supervivencia celular.
• Tras la unión del ligando, MET sufre autofosforilación en residuos de tirosina, incluidos Y1234 y Y1235 en el bucle de activación, lo que crea sitios de acoplamiento para efectores corriente abajo como PI3K, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 y GAB1. Esto activa múltiples cascadas: RAS-ERK (efectos morfogenéticos), PI3K-AKT (proservivencia) y las vías PLCgamma-PKC.
• Durante el desarrollo embrionario, la señalización de MET es esencial para la gastrulación, migración de precursores neuronales, angiogénesis, formación renal y desarrollo del músculo esquelético (migración de progenitores musculares y proliferación secundaria de mioblastos). En adultos, contribuye a la cicatrización de heridas, regeneración de órganos, remodelación tisular y hematopoyesis.
• MET se localiza principalmente en la membrana celular, pero también existe una forma secretada. Se expresa en hepatocitos normales y células epiteliales que revisten el estómago, intestino delgado y grueso, así como en queratinocitos basales del esófago y la piel. Se observa una alta expresión en hígado, tracto gastrointestinal, tiroides, riñón y cerebro, con niveles de proteína detectables en hueso metafisario. Referencias relacionadas: PMID:26637977
• La proteína actúa como receptor de la internalina InlB de Listeria monocytogenes, mediando la entrada bacteriana en las células huésped.
• MET se clasifica como tirosina quinasa proteica, glicoproteína y fosfoproteína, y está asociado a reordenamientos cromosómicos ligados a enfermedades. También está sujeto a splicing alternativo y conjugación con ubiquitina.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo es un péptido fosforilado sintético que cubre Y1234 y Y1235 del MET humano. Para WB y ELISA, se recomienda incluir competición con no fosfopéptidos o lisados tratados con fosfatasa para confirmar la especificidad por la fosforilación.
• Para WB, se espera una banda de aproximadamente 156 kDa. Dado que MET es una proteína de membrana, utilice buffers de lisis apropiados (por ejemplo, RIPA) e incluya inhibidores de proteasas y fosfatasas. Para ELISA, valide el anticuerpo con fosfopéptido recubierto y controles apropiados.
• Estimular las células con HGF antes de la lisis puede mejorar la detección de MET fosforilado en estos sitios. Tenga en cuenta los niveles de fosforilación basal en la línea celular de su interés.
• Este anticuerpo está validado para muestras humanas; no se ha establecido la reactividad cruzada con otras especies.

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