Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-MKK3 (S189) + MKK6 (S207) para WB/IF/ELISA - P46734 / P52564

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MKK3 y MKK6

• MKK3 (cinasa quinasa de MAP 3), también conocida como MEK3 o SAPKK2, está codificada por el gen MAP2K3 y pertenece a la familia de proteínas quinasas de doble especificidad. Está estrechamente relacionada con MKK6 (codificada por MAP2K6): ambas proteínas comparten una alta homología y funcionan como activadores clave de las proteínas quinasas p38 MAP.
• Como quinasa de doble especificidad, MKK3 cataliza la fosforilación concomitante de residuos de treonina y tirosina en el bucle de activación de las isoformas de la quinasa p38 MAP, un paso crítico en la señalización respuesta al estrés.
• MKK3 se activa por diversos estrés ambientales y citoquinas proinflamatorias in vivo, conectando señales extracelulares con respuestas intracelulares como la inflamación, la diferenciación y la apoptosis.
• Actúa dentro de una vía de transducción de señales iniciada por el receptor adrenérgico ADRA1B, que conduce a la activación de MAPK14 (p38α), lo que pone de relieve su papel en la señalización por receptores acoplados a proteínas G.
• A nivel tisular, MKK3 presenta una expresión abundante en el músculo esquelético y se expresa ampliamente en otros tejidos, lo que sugiere una amplia participación en la regulación del estrés y el metabolismo.
• Las modificaciones postraduccionales de MKK3 incluyen acetilación y fosforilación; el residuo S189 es un sitio de activación crítico. La proteína también sufre splicing alternativo que produce múltiples isoformas.
• MKK3 está asociado a variantes patológicas y su desregulación se ha implicado en condiciones patológicas, lo que subraya su importancia como objetivo terapéutico.

Guía experimental y consejos técnicos

• Debido a que este anticuerpo reconoce la fosforilación en S189 de MKK3 y S207 de MKK6, utilice inhibidores de fosfatasa durante la lisis celular y la preparación de muestras para preservar las señales de fosforilación.
• Para Western blot, considere cargar controles positivos tratados con inductores de estrés (por ejemplo, anisomicina, UV o choque osmótico) para verificar la reactividad del anticuerpo frente a las formas activadas.
• En inmunofluorescencia, valide el anticuerpo en líneas celulares relevantes en condiciones estimuladas frente a no estimuladas para confirmar la localización específica de la señal de fosforilación.
• Se pueden observar múltiples bandas correspondientes a diferentes isoformas y variantes de splicing (pesos moleculares reportados de alrededor de 36–39 kDa para MKK3 y 31–37 kDa para MKK6); consulte los pesos proteicos específicos y asegúrese de utilizar marcadores de peso molecular adecuados.

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