Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-NCF4 (p40-fox) T154 para WB y ELISA - Q15080

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NCF4/p40-fox

• NCF4 codifica el factor 4 del citosol de neutrófilos, también conocido como p40-fox, una subunidad reguladora esencial del complejo NADPH oxidasa de fagocitos.
• Junto con otros factores citosólicos, p40-fox participa en el ensamblaje y activación del complejo enzimático NOX2, que genera aniones superóxido para la eliminación microbiana.
• La proteína contiene un dominio PX N-terminal que se une al fosfatidilinositol 3-fosfato, dirigiendo el complejo a las membranas fagosomales y endosomales.
• Un dominio SH3 central media las interacciones con otras subunidades de la oxidasa, facilitando el ensamblaje del complejo.
• La fosforilación en Thr154 es crítica para la activación, promoviendo cambios conformacionales y translocación a la membrana.
• Expresado exclusivamente en células hematopoyéticas, NCF4 juega un papel especializado en la defensa inmune innata.
• Las mutaciones en NCF4 se asocian con la enfermedad granulomatosa crónica (CGD), caracterizada por infecciones recurrentes debido a una producción defectuosa de superóxido.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Verifique la fosfo-especificidad pre-incubando el anticuerpo con péptido no fosforilado o tratando lisados celulares con fosfatasa; la pérdida de señal confirma la dependencia de la fosforilación.
• Para Western blot, optimice la dilución del anticuerpo usando un control positivo como lisados de neutrófilos estimulados con éster de forbol o células HL-60; incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar la fosforilación.
• En ELISA, recubra con el inmunógeno de péptido fosforilado y compare la unión con su contraparte no fosforilada para evaluar la especificidad.
• Considere la eliminación de membrana y el reprobado con un anticuerpo total de NCF4 para normalizar los niveles de fosforilación con la abundancia de proteína.

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