Anticuerpo monoclonal Anti-Fosfo-NF-kB p65/RelA (S536) para WB, IF/ICC, ELISA - Q04206

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NF-κB p65/RelA

• RELA codifica el factor de transcripción p65 (también conocido como subunidad p65 del factor nuclear NF-kappa-B), una subunidad central del complejo NF-κB.
• NF-κB es un factor de transcripción pleiotrópico que controla genes involucrados en la inflamación, la inmunidad, el crecimiento celular, la diferenciación, la tumorigénesis y la apoptosis, y se activa mediante diversos estímulos.
• p65 forma homodímeros o heterodímeros con otras proteínas Rel; el heterodímero RELA-NFKB1 es el más abundante y activa la transcripción.
• En células en reposo, NF-κB se mantiene en el citoplasma por inhibidores de IκB; tras la activación, IκB se degrada, liberando a NF-κB para que se translocado al núcleo y se una al ADN.
• La fosforilación en la serina 536 (S536) del dominio de transactivación mejora la activación transcripcional y actúa como marcador de la activación de la vía de NF-κB.
• p65 se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, realizando tráfico en respuesta a señales celulares.
• p65 sufre múltiples modificaciones postraduccionales (fosforilación, acetilación, metilación, ubiquitinación, S-nitrosilación) que regulan su función.
• p65 es esencial para la expresión de genes de citocinas en linfocitos T y regula la respuesta al interferón durante la infección por SARS-CoV-2. Referencias relacionadas: PMID:15790681, PMID:33440148

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de S536; se recomienda utilizar un control de péptido no fosforilado para confirmar la fosfo-especificidad en su ensayo.
• Para western blot, se espera una banda principal alrededor de 65 kDa; valide la detección en lisados de células estimuladas frente a no estimuladas para confirmar la fosforilación dependiente de la activación.
• Para inmunofluorescencia/ICC, incluya una permeabilización adecuada y considere la co-tinción con un anticuerpo contra p65 total o un marcador nuclear para visualizar la translocación.
• Los protocolos de ELISA pueden utilizar este anticuerpo para capturar fosfo-p65; optimice las condiciones de recubrimiento y detección para la matriz de muestra específica.

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