mAb de conejo anti-Fosfo-NF-kB p65/RelA (Ser529) para WB y ELISA - Q04206

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA es una subunidad del complejo del factor de transcripción NF-kappa-B, que forma diversos homodímeros y heterodímeros; el heterodímero RELA-NFKB1 es el más abundante.
• NF-kB regula una amplia gama de procesos biológicos como la inflamación, la inmunidad, la diferenciación celular y la apoptosis.
• En estado inactivo, NF-kB se mantiene retenida en el citoplasma por las proteínas inhibidoras I-kappa-B; tras la estimulación, I-kappa-B se fosforila y degrada, lo que permite la translocación nuclear de NF-kB.
• La fosforilación en residuos específicos, incluida la Ser529, es una modificación postraduccional crucial que modula la actividad transcripcional de RelA, la unión al ADN y la interacción con cofactores.
• RelA es esencial para la expresión de genes de citoquinas en las células T.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15790681
• RelA actúa como un factor de transcripción clave que regula la respuesta al interferón durante la infección por SARS-CoV-2.
  Referencias relacionadas:
  PMID:33440148
• Subcelularmente, RelA se desplaza entre el citoplasma y el núcleo, un proceso estrictamente controlado por fosforilación y unión a inhibidores.
• Está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que ajustan finamente su actividad.

Guía experimental y consejos técnicos

• Al tratarse de un anticuerpo fosfoespecífico, se recomienda tratar las muestras con inhibidores de fosfatasas durante su preparación y verificar la especificidad de la señal mediante controles de desfosforilación o tratamiento con los estímulos correspondientes.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 60 kDa para la RelA de longitud completa; sin embargo, el peso molecular aparente puede cambiar debido a eventos de fosforilación múltiple.
• Para aplicaciones de ELISA, el uso de un péptido inmunógeno o un estándar de proteína fosforilada puede ayudar a optimizar las concentraciones de recubrimiento y la sensibilidad de detección.
• Puede ser necesario realizar pruebas de reactividad cruzada con especies no humanas si la secuencia diana está conservada, pero solo se dispone de datos de validación para muestras humanas.
• Titule siempre el anticuerpo en sus condiciones experimentales específicas para determinar las diluciones de trabajo óptimas.

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