mAb de conejo Anti-Fosfo-NFKB1-S337 para WB, ELISA - P19838

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NFKB1

• NFKB1 codifica la proteína precursora p105, que se procesa hasta obtener la subunidad activa p50 del complejo del factor de transcripción NF-kappa-B. La forma p105 también retiene las proteínas de NF-kappa-B en el citoplasma. Referencias relacionadas: PMID:1423592
• El complejo NF-kappa-B es un factor de transcripción pleiotrópico presente en casi todos los tipos de células y regula genes implicados en la inflamación, la inmunidad, la diferenciación, el crecimiento celular y la apoptosis.
• La subunidad activa p50 forma heterodímeros con RELA/p65 para crear el complejo p65-p50, un activador transcripcional principal que se une a la secuencia consenso kappa-B en los potenciadores de los genes diana. Referencias relacionadas: PMID:1740106, PMID:7830764
• Los homodímeros p50-p50 actúan como represores transcripcionales, pero pueden convertirse en activadores cuando se asocian con BCL3.
• NFKB1/p105 también reprime la señalización MAPK inducida por MAP3K8 hasta que la degradación dependiente del proteasoma libera la MAP3K8 activa.
• La localización subcelular alterna entre el citoplasma (inactivo, unido a inhibidores) y el núcleo (activo, después de liberarse de I-kappa-B).
• La fosforilación en la serina 337 es una de las múltiples modificaciones postraduccionales que regulan la actividad, el procesamiento o las interacciones de NFKB1; este anticuerpo reconoce específicamente la forma fosforilada en este sitio.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor del residuo S337; confirme la especificidad utilizando muestras tratadas con fosfatasa o mediante competición con péptido no fosforilado.
• Para Western blot, considere el uso de muestras de células estimuladas para activar la señalización de NF-kappa-B (por ejemplo, con TNF-α) para observar los desplazamientos de banda fosfo-específicos a 85kDa/105kDa.
• La detección por ELISA se puede optimizar combinándola con un anticuerpo anti-NFKB1 total o utilizando detección fosfo-específica.
• Valide en líneas celulares o tejidos humanos con activación conocida de NF-kappa-B; no se garantiza la reactividad cruzada con otras especies.
• Incluya siempre controles negativos y positivos adecuados para distinguir la señal dependiente de fosforilación.

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