Anticuerpo Policlonico Anti-Fosfo-NMDAR1 (S896/S897) para WB y ELISA - Q05586

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NMDAR1 (GluN1)

• Codificado por el gen GRIN1, la proteína GluN1 (también denominada NR1, NMDAR1) es la subunidad obligatoria de los receptores NMDA, esenciales para la neurotransmisión excitatoria en el sistema nervioso central.
• Los receptores NMDA forman canales catiónicos heterotetraméricos activados por ligando, con alta permeabilidad al calcio y bloqueo por magnesio dependiente de voltaje, que contribuyen a la plasticidad sináptica, el aprendizaje y la memoria (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Referencias relacionadas: PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• La subunidad GluN1 se ensambla con subunidades GluN2 (A-D) o GluN3 (A-B) para formar receptores NMDA funcionales; diferentes composiciones de subunidades confieren propiedades farmacológicas y cinéticas distintas al canal (PubMed:26875626, PubMed:26919761, PubMed:36309015). Referencias relacionadas: PMID:26875626 PMID:26919761 PMID:36309015
• La apertura del canal requiere la unión simultánea de L-glutamato a la subunidad GluN2 y de glicina o D-serina a la subunidad GluN1, junto con una despolarización de la membrana para eliminar el bloqueo de Mg²⁺ dependiente de voltaje; esto permite la entrada de Ca²⁺ y Na⁺ y la salida de K⁺ (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Referencias relacionadas: PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• El dominio C-terminal de GluN1 está sujeto a extensas modificaciones postraduccionales, incluida la fosforilación en los residuos Ser896 y Ser897, que puede modular el tráfico y la función del receptor.
• Los receptores NMDA se localizan predominantemente en la membrana de la densidad postsináptica de las sinapsis excitatorias, lo que los coloca en el centro de la señalización y la plasticidad sináptica.
• Las mutaciones en GRIN1 se asocian a trastornos del neurodesarrollo, como epilepsia, discapacidad intelectual y encefalopatía epiléptica del desarrollo (DEE101), lo que pone de relieve el papel fundamental de GluN1 en la función cerebral.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que este anticuerpo reconoce la fosforilación en S896/S897, incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar el epítopo fosforilado.
• Para transferencia western, el peso molecular predicho de NMDAR1 es de ~105 kDa; utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, SDS-PAGE al 8-10%) y condiciones de transferencia apropiadas para proteínas de alto peso molecular.
• Valide la especificidad mediante ensayos de competición con péptidos: preincube el anticuerpo con el péptido inmunógeno fosforilado o con un péptido no fosforilado para confirmar el reconocimiento fosfoespecífico.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede utilizar con el péptido fosforilado como antígeno de recubrimiento; optimice la concentración de recubrimiento y las condiciones de detección.
• Considere la posibilidad de utilizar lisados de control positivo procedentes de tejido cerebral humano, de ratón o de rata, o de líneas celulares neuronales que se sabe que expresan NMDAR1.
• La reactividad cruzada con humano, ratón y rata indica que el epítopo está conservado; no obstante, realice la validación en la especie y el sistema modelo correspondientes.

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