Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-NRF2-S40 para WB - Q16236

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NRF2

• NRF2 (factor eritroide 2 relacionado 2), codificado por NFE2L2, es un factor de transcripción que regula las respuestas celulares al estrés oxidativo uniéndose a elementos de respuesta antioxidante (ARE) en los promotores de genes citoprotectores.
  Referencias relacionadas: PMID:11035812 PMID:19489739 PMID:29018201
• En condiciones basales, NRF2 se mantiene a niveles bajos a través de la ubiquitinación mediada por KEAP1 y la degradación proteosomal en el citoplasma.
  Referencias relacionadas: PMID:11035812 PMID:15601839 PMID:29018201
• Ante el estrés oxidativo o un desafío electrofílico, KEAP1 se inhibe, permitiendo que NRF2 se transloque al núcleo, se dimerice con proteínas Maf pequeñas y active la transcripción génica impulsada por ARE.
  Referencias relacionadas: PMID:19489739 PMID:29590092
• NRF2 también participa en la autofagia selectiva, donde la interacción SQSTM1/p62-KEAP1 conduce a la estabilización de NFE2L2 y la activación de la vía.
  Referencias relacionadas: PMID:20452972
• Más allá de la regulación redox, NRF2 suprime las respuestas inmunitarias innatas e inflamatorias bloqueando la transcripción de citoquinas proinflamatorias e inhibiendo la dimerización de IRF3, y restringe la replicación de virus incluyendo SARS-CoV-2, HSV y el virus Zika.
  Referencias relacionadas: PMID:30158636 PMID:33009401
• NRF2 se expresa ampliamente, con los niveles más altos en músculo adulto, riñón, pulmón, hígado y músculo fetal. A nivel subcelular, se desplaza entre el citoplasma y el núcleo.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación (p. ej., en Ser-40), acetilación, glicación y ubiquitinación, que modulan su estabilidad y actividad.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas de NRF2.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para la transferencia Western (Western blotting), considere usar condiciones reductoras y cargar cantidades apropiadas de proteína de lisados celulares tratados con inductores de estrés oxidativo (p. ej., H₂O₂) para detectar la fosforilación de NRF2 en Ser-40.
• Para IHC-P, valide la tinción en tejidos positivos para NRF2 como el hígado o el riñón, e incluya un tratamiento con inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Se ha reportado reactividad cruzada con ratón y rata; verifique el tamaño de banda esperado (~68 kDa) en las especies relevantes.
• En inmunofluorescencia, monitoree la translocación nuclear tras la inducción de estrés oxidativo.
• Para ELISA, use controles de péptidos fosforilados para confirmar la especificidad.

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