Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-p53 (S33) para WB, IHC-P, IP, ELISA - P04637

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de p53

• Codificado por el gen TP53, el antígeno tumoral celular p53 es un factor de transcripción multifuncional que actúa como un potente supresor tumoral al regular la detención del ciclo celular, la reparación del ADN y la apoptosis en respuesta a diversos estreses celulares. Referencias relacionadas: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724

• p53 ejerce sus funciones proapoptóticas tanto mediante activación transcripcional (por ejemplo, BAX y FAS) como por represión (por ejemplo, Bcl-2), y su actividad está modulada por interacciones con proteínas de la familia ASPP. Referencias relacionadas: PMID:12524540 PMID:17189187

• Más allá de la transcripción nuclear, p53 también se localiza en el citoplasma, las mitocondrias, el retículo endoplásmico y los centríolos, lo que refleja su participación en la apoptosis y necrosis no transcripcionales.

• p53 se expresa de forma ubicua en todos los tejidos humanos normales, y varias isoformas alternativas presentan patrones de expresión dependientes del tejido.

• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que regulan estrictamente la estabilidad, la localización subcelular y la actividad transcripcional de p53.

• p53 contribuye a la regulación del reloj circadiano al reprimir la activación transcripcional de PER2 mediada por CLOCK-BMAL1. Referencias relacionadas: PMID:24051492

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de la Ser33 de p53 humana. Para validar la especificidad por la forma fosforilada, considere utilizar muestras tratadas con fosfatasa lambda o competición con no fosfopéptido en paralelo.
• Para western blot (WB), el tamaño de banda predicho es ~53 kDa (p53 canónico) o 44 kDa (algunas isoformas); las bandas pueden sufrir pequeños desplazamientos debido a la fosforilación y otras modificaciones.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígeno y la fijación del tejido pueden afectar la detección del epítopo fosforilado; optimice el procedimiento utilizando controles positivos conocidos, como tejidos tratados con radiación o estrés genotóxico.
• Al realizar inmunoprecipitación (IP) o ELISA, incluya controles de IgG adecuados y considere combinarlo con un anticuerpo contra p53 total para evaluar la estequiometría de la fosforilación.
• Este anticuerpo tiene reactividad cruzada con p53 de ratón y rata, por lo que es adecuado para estudios traslacionales; sin embargo, confirme siempre la reactividad cruzada en su sistema de modelo específico.

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