Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-PAK2 (S20) para WB, ELISA - Q13177

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de PAK2

• La proteína serina/treonina quinasa PAK2, también conocida como PAK65, Gamma-PAK o p58, es un miembro de la familia de quinasas activadas por p21 (PAK).
• Actúa como efector aguas abajo de las GTPasas pequeñas CDC42 y RAC1; su unión conduce a autofosforilación y activación de la quinasa. Referencias relacionadas: PMID:7744004
• Fosforila diversos sustratos, entre ellos la histona H4 para promover el ensamblaje de nucleosomas, JUN para la proliferación inducida por EGF y MAPK4/6 para regular la polimerización de F-actina. Referencias relacionadas: PMID:21724829, PMID:21177766, PMID:21317288
• La escisión mediada por caspasa genera PAK-2p34, que se transloca al núcleo y promueve la apoptosis a través de la señalización de JNK; también fosforila a MKNK1 para reducir la traducción celular. Referencias relacionadas: PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063, PMID:15234964
• Se localiza en el citoplasma, el núcleo, la región perinuclear y la membrana, y ejerce funciones independientes de la quinasa en la orientación del huso mitótico cuando se asocia con ARHGEF7 y GIT1. Referencias relacionadas: PMID:19273597, PMID:19923322
• Se expresa de forma ubicua con niveles más altos en músculo esquelético, ovario, timo y bazo; está modificado postraduccionalmente por acetilación, miristoilación y conjugación de ubiquitina.
• También fosforila e inhibe a CASP7, impidiendo la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:21555521, PMID:27889207

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de la serina 20, se espera que este anticuerpo reconozca específicamente a PAK2 fosforilado en S20; considere el uso de inhibidores de fosfatasas en la preparación de muestras para preservar la fosforilación.
• Para Western blot, se validó en líneas celulares humanas que expresan PAK2 y confirma la banda de ~58 kDa; la reactividad cruzada con ratón y rata permite estudios en estas especies, pero debe comprobarse la homología de secuencia alrededor de S20.
• En ELISA, utilice un control de péptido no fosforilado para verificar la fosfoespecificidad.
• Incluya controles adecuados (por ejemplo, lisados sin tratar frente a lisados tratados con fosfatasa) para confirmar la dependencia de la fosforilación.
• Las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente; si están disponibles, comience con las recomendaciones del fabricante.

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