Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-PDHA1-S293 para WB y ELISA - P08559

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PDHA1

• PDHA1 codifica la forma somática de la subunidad alfa de la piruvato deshidrogenasa E1, un complejo enzimático clave que vincula la glucólisis citoplasmática con la producción de energía mitocondrial.
• Junto con PDHB, el heterotetrámero E1 (α₂β₂) cataliza la descarboxilación dependiente de tiamina pirofosfato (TPP) del piruvato y la subsiguiente acetilación reductora del componente E2 portador de lipoilo, un paso crítico en la conversión de piruvato a acetil‑CoA y CO₂. Referencias relacionadas: PMID:17474719 PMID:19081061 PMID:7782287
• El complejo PDH reside en la matriz mitocondrial, donde PDHA1 se localiza para facilitar el acoplamiento directo con el ciclo de TCA.
• PDHA1 se expresa de manera ubicua en todos los tejidos humanos, lo que es consistente con su papel central en el metabolismo de la glucosa.
• La proteína está sujeta a modificaciones postraduccionales regulatorias, incluyendo fosforilación en múltiples residuos de serina y acetilación, que modulan la actividad enzimática.
• Las mutaciones asociadas a enfermedades en PDHA1 están vinculadas al síndrome de Leigh y otros trastornos mitocondriales primarios, subrayando su importancia metabólica.
• Como miembro de la familia de la piruvato deshidrogenasa, PDHA1 requiere tiamina pirofosfato (derivado de la vitamina B1) y magnesio como cofactores para su actividad catalítica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado correspondiente a los residuos que rodean a Ser293 de PDHA1 humano. Para obtener resultados óptimos, considere usar cócteles de inhibidores de fosfatasas durante la lisis de células/tejidos para preservar el epítopo fosfo.
• En Western blotting, debe ser detectable una banda específica de aproximadamente 43 kDa (el peso molecular de PDHA1). Valide la especificidad tratando las muestras con fosfatasa lambda o usando bloqueo con péptido no fosforilado.
• Para aplicaciones de ELISA, considere recubrir las placas con el péptido inmunógeno fosforilado como control positivo y una contraparte no fosforilada para confirmar la especificidad fosfo.
• Se reporta reactividad cruzada para PDHA1 humano, de ratón y de rata; sin embargo, es recomendable verificar la reactividad en su sistema de muestra, especialmente cuando se usan extractos de tejidos no humanos.

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