Anticuerpo monoclonal de conejo anti-fosfo-PERK (T982) para WB, IHC-P, ELISA - Q9NZJ5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PERK

• EIF2AK3/PERK es una quinasa sensora de estrés metabólico que fosforila eIF2-alfa (EIF2S1) en Ser51 en respuesta al estrés del retículo endoplásmico (ER), un paso central en la respuesta a proteínas desplegadas (UPR).
  Referencias relacionadas: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• La fosforilación de eIF2-alfa por PERK inhibe la traducción global dependiente de cap mientras mejora selectivamente la traducción de ARNm sensibles al estrés, como ATF4 y QRICH1, permitiendo la reprogramación celular bajo estrés.
  Referencias relacionadas: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• La UPR mediada por PERK mejora la fosforilación oxidativa mitocondrial al promover la expresión dependiente de ATF4 de COX7A2L/SCAF1, lo que aumenta la formación de supercomplejos de la cadena respiratoria.
  Referencias relacionadas: PMID:31023583
• PERK es inhibido en los sitios de contacto mitocondria-ER por ATAD3A, protegiendo a las mitocondrias del cierre traduccional global de la UPR.
  Referencias relacionadas: PMID:39116259
• Más allá de eIF2-alfa, PERK también fosforila NFE2L2/NRF2, lo que desencadena su liberación de KEAP1 y su posterior acumulación nuclear para activar la expresión de genes antioxidantes.
• PERK es una proteína transmembrana residente en el ER y se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en tejidos secretores.
• La proteína tiene un peso molecular de ~125 kDa y pertenece a la familia de las proteínas quinasas Ser/Thr, con actividad adicional de tirosina quinasa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo fue generado contra un fosfopéptido sintético correspondiente al sitio de fosforilación Thr982 de PERK humano; reconoce específicamente PERK fosforilado y no detectará la forma no fosforilada. Verifique la especificidad por fosforilación en su sistema experimental, por ejemplo, mediante tratamiento con fosfatasa.
• Para Western Blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 125 kDa. Optimice el bloqueo y la dilución del anticuerpo para minimizar la unión inespecífica, y considere cargar controles apropiados (por ejemplo, lisados celulares bajo estrés frente a condiciones basales).
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígeno pueden influir en la tinción; valide con muestras de tejido positivas y negativas conocidas y considere usar un protocolo de detección específico para fosforilación.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con PERK de ratón y rata, lo que permite estudios traslacionales; sin embargo, confirme la reactividad en su tejido o líneas celulares específicas, ya que el estado de fosforilación puede variar.
• Para aplicaciones de ELISA, este anticuerpo puede utilizarse como reactivo de detección o captura, pero las condiciones del ensayo (recubrimiento, bloqueo, método de detección) deben optimizarse para la detección específica de fosforilación.

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