Anticuerpo policlonal de conejo anti-fosfo-PI3K p85α/p55γ/p85β (Y467/Y199/Y464) para WB, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la subunidad reguladora de PI3K p85α (PIK3R1)

• Codificada por el gen PIK3R1, la subunidad reguladora alfa de la fosfatidilinositol 3-quinasa (p85α) es una proteína adaptadora clave que contiene dominios SH2 y SH3, y media el reclutamiento de la subunidad catalítica p110 hacia los receptores tirosina quinasa activados en la membrana plasmática.
• A través de sus dominios SH2, p85α se une a residuos de tirosina fosforilados en receptores de factores de crecimiento activados (por ejemplo, FGFR, PDGFR, KIT) y sustratos del receptor de insulina, acoplando así p110 a la señalización descendente de PI3K/AKT. Referencias relacionadas: PMID:7518429 PMID:17626883 PMID:19805105
• p85α es esencial para la captación de glucosa y la síntesis de glucógeno estimuladas por insulina en tejidos sensibles a la insulina, vinculando la actividad de PI3K con la homeostasis metabólica.
• La proteína modula la respuesta celular al estrés del retículo endoplásmico promoviendo la translocación nuclear de XBP1, contribuyendo así a la mejora de la tolerancia a la glucosa en condiciones de sobrecarga metabólica. Referencias relacionadas: PMID:20348923
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas de p85α (por ejemplo, p55α, p50α), con la isoforma 2 expresada predominantemente en el músculo esquelético y el cerebro, y en niveles más bajos en el riñón y el músculo cardíaco.
• Subcelularmente, p85α se localiza en el citoplasma, donde existe como monómero o dímero, y transloca rápidamente a complejos de señalización unidos a la membrana tras la estimulación por factores de crecimiento.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación en múltiples residuos de tirosina (por ejemplo, Y467), acetilación y ubiquitinación, que regulan la estabilidad de la proteína, los socios de interacción y la terminación de la señal.
• La proteína también está implicada en las interacciones huésped-virus y se clasifica bajo palabras clave como dominio SH2, dominio SH3, fosfoproteína y respuesta al estrés, lo que refleja sus roles versátiles en la regulación celular.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético que corresponde a los residuos alrededor de Y467 de la p85α humana; el anticuerpo presenta reactividad cruzada con sitios de fosforilación equivalentes en p55γ (Y199) y p85β (Y464). Considere verificar la especificidad mediante ensayos de competición de péptidos o tratamiento con fosfatasa.
• Para Western blotting, utilice lisados de células completas preparados con inhibidores de fosfatasa para preservar los fosfo-epítopos. Bandas esperadas: p85α/p85β alrededor de 81-84 kDa y p55γ alrededor de 42-54 kDa. Incluya controles de carga adecuados y marcadores de peso molecular.
• El anticuerpo ha sido validado para ELISA; para análisis cuantitativos, considere combinarlo con un anticuerpo anti-PI3K total para normalizar los niveles de fosforilación.
• Para confirmar la reactividad con proteínas endógenas, pruebe en líneas celulares humanas, de ratón o de rata bien caracterizadas (por ejemplo, muestras estimuladas con insulina o tratadas con factores de crecimiento) y consulte la literatura para conocer la dinámica de fosforilación esperada.

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