Anticuerpo policlonal de conejo anti-fosfo-PKC alfa (S319) para WB y ELISA - P17252

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la PKC alfa

• La PKC alfa es una serina/treonina quinasa dependiente de calcio, DAG y fosfolípidos (gen PRKCA) que actúa como regulador clave de la proliferación, diferenciación y apoptosis celular.
• Modula la vía MAPK/ERK mediante la fosforilación de RAF1 y ejerce efectos antiapoptóticos a través de la fosforilación de BCL2 y la supresión de IGFBP3 inducida por p53/TP53.
• La PKC alfa desempeña funciones duales en el cáncer: promueve la tumorigénesis en gliomas y cánceres de mama, pero induce la detención del ciclo celular en células intestinales.
• En el sistema cardiovascular, fosforila la troponina T cardíaca (TNNT2), reduciendo la sensibilidad al calcio de los miofilamentos y la contractilidad miocárdica, además de promover la angiogénesis y la agregación plaquetaria.
• Durante la migración de células T dirigida por quimiocinas, la PKC alfa fosforila DOCK8, lo que conduce a su disociación de LRCH1 y a la activación de CDC42 (PubMed:28028151). Referencias relacionadas: PMID:28028151
• Fosforila KLHL3 en respuesta a la angiotensina II, modulando las interacciones con WNK4 y el transporte iónico (PubMed:25313067). Referencias relacionadas: PMID:25313067
• La PKC alfa activa LRRK1, que fosforila proteínas RAB, regulando así el tráfico vesicular intracelular (PubMed:36040231). Referencias relacionadas: PMID:36040231
• La proteína se desplaza entre el citoplasma, la membrana plasmática, la mitocondria y el núcleo; su localización principalmente citosólica se altera tras la activación, siendo la fosforilación un mecanismo regulador clave.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético correspondiente a la Ser319. Por lo tanto, se espera que este anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada de la PKC alfa; valide la especificidad en su sistema de muestras comparando las señales entre lisados estimulados y no estimulados o mediante tratamiento con fosfatasa.
• Para Western blotting, considere cargar lisados de células completas de líneas celulares humanas, de ratón o de rata que se sepa que expresan PKC alfa, y utilice condiciones de bloqueo y lavado adecuadas para minimizar la unión inespecífica.
• En ELISA, asegúrese de que el tampón de recubrimiento del antígeno y la concentración estén optimizados; el anticuerpo puede utilizarse para la detección de fosfopéptidos en formatos competitivos o directos.
• Incluya siempre controles positivos y negativos adecuados (p. ej., células estimuladas frente a no tratadas) para la detección fosfoespecífica.

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