pAb de conejo Anti-Fosfo-PKC (pan) (gamma)-T514 para WB y ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P05129 / P24723 / Q04759

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PKC (pan) (gamma)-T514

• Los miembros de la familia de la proteína quinasa C (PKC) son serina/treonina quinasas activadas por calcio, diacilglicerol (DAG) y fosfolípidos, que regulan diversos procesos celulares entre los que se incluyen la proliferación, apoptosis, diferenciación y migración.
• PKC alfa (PRKCA), una isoforma representativa y de expresión amplia, participa en la regulación positiva y negativa del ciclo celular y puede promover el crecimiento celular a través de la señalización RAF1/ERK o inducir la parada del crecimiento a través de inhibidores de CDK.
• Muestra funciones antiapoptóticas al fosforilar BCL2 y suprimir la activación de IGFBP3 mediada por p53/TP53, y se expresa en altos niveles en muchos cánceres, donde puede actuar como promotor tumoral.
• Sufre translocación dependiente del estímulo entre el citoplasma, la membrana celular, la membrana mitocondrial y el núcleo, lo que permite una señalización específica según el contexto.
• En la función cardíaca, PKC alfa regula la hipertrofia de los cardiomiocitos, la contractilidad miocárdica y la progresión de la insuficiencia cardíaca; fosforila la troponina T cardíaca (TNNT2) para modular la sensibilidad al calcio.
• En la angiogénesis, es necesario para la migración de células endoteliales, la adhesión a la vitronectina y la señalización inducida por VEGFA, estabilizando el ARNm de VEGFA de forma postranscripcional.
• Este anticuerpo reconoce específicamente proteínas PKC fosforiladas en el residuo conservado treonina 514 (T514 en PKC alfa; sitios equivalentes del bucle de activación en las isoformas beta, delta, épsilon, gamma, eta y theta), que es fundamental para una actividad quinasa completa.
• Fosforila KLHL3 en Ser-52 en respuesta a la señalización de angiotensina II, disminuyendo la interacción entre KLHL3 y WNK4. Referencias relacionadas: PMID:25313067
• Fosforila DOCK8, lo que conduce a su disociación de LRCH1 y la activación posterior de la GTPasa CDC42 durante la migración de linfocitos T inducida por quimiocinas. Referencias relacionadas: PMID:28028151
• Fosforila LRRK1, que a su vez fosforila proteínas RAB implicadas en el tráfico intracelular. Referencias relacionadas: PMID:36040231

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de T514 de PKC alfa humana; este diseño se dirige al epítopo específico de fosforilación en múltiples isoformas de PKC.
• Para Western blot, incluya inhibidores de fosfatasa en los buffers de lisis y lavado para preservar la fosforilación, y considere el uso de soluciones de bloqueo basadas en BSA para reducir la unión no específica.
• La detección por ELISA se puede realizar en lisados de células o tejidos; optimice las condiciones de recubrimiento y detección para fosfoproteínas, y valide la especificidad usando controles de péptido no fosforilado.
• Debido a que el anticuerpo reconoce varias isoformas de PKC, las respuestas específicas de cada isoforma deben verificarse usando líneas celulares knockout relevantes o inhibidores selectivos de isoformas.
• Las bandas predichas pueden oscilar entre 59 y 83 kDa según la isoforma; confirme el peso molecular en el sistema de muestra de su interés.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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