Anticuerpo Policlonal Anti-Fosfo-POLR2A CTD-S2 para WB, IP, ELISA - P24928

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Información Biológica: Función y Localización de POLR2A (subunidad RPB1 de la ARN polimerasa II dirigida por ADN)

• POLR2A codifica la subunidad mayor y catalítica de la ARN polimerasa II (Pol II), una ARN polimerasa dependiente de ADN responsable de la síntesis de precursores de ARNm y muchos ARN no codificantes funcionales (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474). Referencias relacionadas: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• Junto con la segunda subunidad más grande, POLR2B, forma el centro activo de la Pol II, añadiendo nucleótidos al ARN naciente y proporcionando actividad de corrección de errores a través de una actividad exonucleasa 3'->5' (PubMed:30190596, PubMed:8381534, PubMed:9852112). Referencias relacionadas: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• El dominio C-terminal (CTD) único está formado por 52 repeticiones tandem de heptapéptidos (YSPTSPS) y actúa como una plataforma dinámica para el ensamblaje de factores que regulan la iniciación, elongación y terminación de la transcripción, así como el procesamiento co-transcripcional del ARNm. La fosforilación en Ser5 promueve la escape del promotor, mientras que la fosforilación en Ser2 es fundamental para la liberación de la pausa y la elongación productiva (PubMed:24207025, PubMed:26124092). Referencias relacionadas: PMID:24207025 PMID:26124092
• Además de la actividad de ARN polimerasa dependiente de ADN, POLR2A posee función de ARN polimerasa dependiente de ARN, extendiendo ARN no codificantes y participando en la replicación viral, por ejemplo, con el virus de la hepatitis delta.
• Las modificaciones postraduccionales de POLR2A incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que ajustan finamente su actividad e interacciones.
• POLR2A se localiza predominantemente en el núcleo, pero también se puede encontrar en el citoplasma y asociada a cromosomas, lo que refleja sus roles en la transcripción y otros procesos adicionales.
• El peso molecular calculado es de aproximadamente 217 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a la Ser2 de la repetición CTD de la POLR2A humana; la especificidad del anticuerpo debe confirmarse usando lisados tratados con fosfatasa o un péptido bloqueador no fosforilado.
• Para aplicaciones de Western blot, incluya inhibidores de fosfatasas adecuados en los tampones de lisis y de muestra para preservar la señal de fosforilación.
• Al realizar inmunoprecipitación, asegúrese de que la composición del tampón de lisis mantenga la integridad del fosfoepítopo; la preclarificación de los lisados puede reducir la unión no específica.
• Para ELISA, el recubrimiento con el fosfopéptido inmunizante y la detección con este anticuerpo se pueden usar para evaluar la unión fosfoespecífica; tenga en cuenta la reactividad cruzada con los controles de péptido no fosforilado.
• Este anticuerpo también puede reconocer otras proteínas con motivos fosforilados similares; realice la validación en el sistema de muestra correspondiente.

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