Anticuerpo policlonal de conejo anti-fosfo-PPP2CA/PPP2CB-Y307 para WB y ELISA - P67775 / P62714

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PPP2CA/PPP2CB

• PPP2CA codifica la isoforma alfa de la subunidad catalítica de la serina/treonina-proteína fosfatasa 2A (PP2A), una enzima clave que regula numerosas vías de señalización y procesos celulares.
• PP2A funciona como la fosfatasa principal de las proteínas asociadas a microtúbulos (MAP) y modula quinasas como la fosforilasa B quinasa, la caseína quinasa 2 y la MAP-2 quinasa (PubMed:22613722). Referencias relacionadas: PMID:22613722
• Desfosforila una amplia gama de sustratos, entre ellos el antígeno grande T del SV40, AXIN1, p53/TP53, PIM3, WEE1, MYC, FOXO3 y AKT1, controlando así el crecimiento celular, la apoptosis y las respuestas inmunitarias (PubMed:10801873, PubMed:12473674, PubMed:17245430, PubMed:25438055, PubMed:30513302). Referencias relacionadas: PMID:10801873, PMID:12473674, PMID:17245430, PMID:25438055, PMID:30513302
• PP2A es un componente crítico de los complejos STRIPAK, que regulan las vías Hippo, MAPK, de receptores nucleares y de remodelación del citoesqueleto involucradas en el crecimiento y la diferenciación celular (PubMed:33633399). Referencias relacionadas: PMID:33633399
• Como parte del complejo Integrator-PP2A (INTAC), PPP2CA desfosforila el dominio C-terminal de la ARN polimerasa II y SUPT5H/SPT5, mediando la terminación prematura de la transcripción y el control de calidad durante la elongación (PubMed:33243860, PubMed:34004147, PubMed:37080207). Referencias relacionadas: PMID:33243860, PMID:34004147, PMID:37080207
• Se localiza en el citoplasma, el núcleo, los centrómeros y los polos del huso mitótico, lo que refleja sus diversas funciones en la mitosis, la meiosis y la regulación transcripcional.
• La proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, entre ellas la fosforilación, metilación y ubiquitinación, y contiene sitios de unión para iones de hierro, manganeso y zinc.

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético fosforilado en Y307, asegúrese de que los tampones de bloqueo y detección estén optimizados para anticuerpos fosfo-específicos para mantener el reconocimiento del epítopo.
• Para Western blot, trate las muestras con inhibidores de fosfatasas para preservar el estado de fosforilación; incluya un control positivo (por ejemplo, células tratadas con pervanadato) para confirmar la especificidad por la forma fosforilada.
• Para ELISA, considere recubrir con el péptido fosforilado y usar un anticuerpo secundario anti-conejo para la detección. Valide la reactividad cruzada con muestras de ratón como se indica.
• Al realizar la WB, el peso molecular esperado de PPP2CA es de aproximadamente 36 kDa; tenga en cuenta que PPP2CB puede migrar de forma similar.

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