Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-PTK2B (Y402) para WB, IF/ICC, ELISA - Q14289

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína-tirosina quinasa 2-beta

• Proteína-tirosina quinasa no receptora que regula la reorganización del citoesqueleto de actina, la polarización celular, la migración, la adhesión, la extensión celular y la remodelación ósea.
• Desempeña un papel en la respuesta inmune humoral, siendo necesaria para mantener niveles normales de linfocitos B marginales en el bazo y para la migración de linfocitos B esplénicos; también regula la polarización de macrófagos y las respuestas de linfocitos T.
• Promueve la reabsorción ósea osteoclástica mediante la cooperación con la quinasa SRC, y puede inhibir la diferenciación de células osteoprogenitoras.
• Funciona aguas abajo de una amplia gama de receptores, entre los que se incluyen receptores de integrinas, inmunes, acoplados a proteínas G, de citoquinas, de quimioquinas y de factores de crecimiento, y media las respuestas al estrés celular.
• Tras la activación, forma complejos de señalización con SRC y quinasas de la familia SRC, lo que conduce a la fosforilación de residuos de tirosina adicionales que crean sitios de unión para proteínas andamio, efectores y sustratos.
• Activa múltiples vías de señalización descendentes, entre ellas PI3K/AKT1, cascadas de quinasas MAP (ERK, JNK) y GTPasas de la familia Rho (RHOA, RAC1), controlando así diversos procesos celulares.
• Contribuye a la regulación de la actividad del canal iónico del receptor NMDA y los niveles de calcio intracelular al promover la fosforilación de receptores NMDA mediada por SRC.
• Se encuentra en mayor abundancia en el cerebro, especialmente en la amígdala y el hipocampo; también se expresa en el bazo, los linfocitos y en menores niveles en el riñón. A nivel subcelular, se localiza en el citoplasma, las adhesiones focales, los lamélipodios, la corteza celular y el núcleo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a la tirosina 402 de PTK2B humana; la especificidad por la forma fosforilada debe confirmarse mediante tratamiento con fosfatasa o controles con péptido bloqueador no fosforilado.
• Para Western blotting, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar la fosforilación, y considere usar un anticuerpo anti-PTK2B no fosforilado como control de carga para verificar la señal dependiente de fosforilación.
• En inmunofluorescencia/ICC, las condiciones de fijación y permeabilización deben optimizarse para el tipo celular; la co-tinción con un anticuerpo pan-PTK2B puede ayudar a confirmar la localización fosfo-específica.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; valídelo con péptidos fosforilados y no fosforilados para garantizar la especificidad en el sistema de ensayo.
• Según los datos del proveedor, el anticuerpo presenta reactividad cruzada con PTK2B de humano, ratón y rata; sin embargo, se recomienda realizar la validación en la especie específica y el contexto experimental antes de realizar estudios cuantitativos.

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