Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-RB (Ser780) para WB, IHC-P, ELISA - P06400

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RB1

• La proteína asociada al retinoblastoma (RB1) es un supresor de tumores y un regulador clave de la transición G1/S del ciclo celular. Actúa uniéndose a los factores de transcripción E2F, reprimiendo la transcripción de los genes necesarios para la entrada en la fase S. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• La fosforilación de RB1 por quinasas dependientes de ciclinas (CDK) conduce a su disociación de E2F, activando así la transcripción y promoviendo la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• RB1 también facilita la transición G0-G1 tras la fosforilación por CDK3/ciclina-C. Referencias relacionadas: PMID:15084261
• Participa directamente en la formación de heterocromatina al mantener la estructura de la cromatina y estabilizar la metilación de histonas, reclutando metiltransferasas de histonas como SUV39H1.
• Su localización subcelular incluye el núcleo y el citoplasma, acorde con sus funciones en la regulación transcripcional y el control del ciclo celular.
• Se expresa en la retina y en queratinocitos del prepucio, con una amplia distribución tisular que refleja su función fundamental en el ciclo celular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, acetilación y metilación, que modulan su actividad e interacciones. Su alteración por oncoproteínas virales (p. ej., antígeno T grande del SV40, HPV E7) ilustra su papel central en el control del crecimiento.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de la Ser780 de RB humana. Para confirmar la especificidad para la fosforilación, incluya lisados tratados con fosfatasa o compita con péptido no fosforilado en su ensayo.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 106 kDa en condiciones reductoras. Utilice controles positivos (p. ej., células en ciclo) y negativos (p. ej., células privadas de suero o deficientes en RB) apropiados para verificar la identidad de la banda.
• En IHC-P, las condiciones de recuperación de antígeno (p. ej., tampón citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0) y la dilución del anticuerpo deben optimizarse según el tipo de tejido. La tinción conjunta con un anticuerpo anti-RB total puede ayudar a evaluar el estado de fosforilación en el contexto tisular.
• Se informa que el anticuerpo reacciona de forma cruzada con RB de ratón y rata; sin embargo, se recomienda su validación en la especie y sistema experimental relevantes.
• Para ELISA, considere recubrir con péptido fosforilado y verificar la especificidad frente al péptido no fosforilado.

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