Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-RET (Tyr905) para WB y ELISA - P07949

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RET

• RET (receptor de tirosina quinasa proto-oncogénico Ret) es un miembro de la superfamilia de las cadherinas, que funciona como una receptor tirosina quinasa que requiere tanto ligando como correceptor para su activación.
  Referencias relacionadas: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:28846097
• Desempeña papeles esenciales en la proliferación celular, navegación neuronal, migración celular y diferenciación, particularmente durante el desarrollo del sistema nervioso entérico y el riñón.
  Referencias relacionadas: PMID:20064382, PMID:20616503, PMID:20702524, PMID:21994944
• La señalización de RET se activa cuando los ligandos de la familia GDNF se unen a los correceptores GFRα, lo que genera la dimerización del receptor, su autofosforilación y la activación de las vías downstream MAPK y AKT.
  Referencias relacionadas: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:24560924, PMID:28846097
• RET también funciona como un receptor de dependencia, que promueve la supervivencia celular en presencia del ligando e induce la apoptosis en su ausencia; este mecanismo es fundamental en los somatotrofos pituitarios y las neuronas simpáticas.
  Referencias relacionadas: PMID:20616503, PMID:21357690
• A nivel subcelular, RET se localiza en la membrana plasmática y la membrana del endosoma, donde la señalización puede mantenerse o modularse.
• Como fosfoproteína, la actividad quinasa de RET depende de la autofosforilación de residuos de tirosina clave, incluida la Tyr905 en el dominio quinasa, que es esencial para la activación catalítica y la transducción de señales.
• Las mutaciones oncogénicas y de pérdida de función en RET están asociadas a neoplasias endocrinas múltiples tipos 2A/2B (MEN2A, MEN2B) y la enfermedad de Hirschsprung (HSCR1), lo que resalta su relevancia clínica en trastornos neuroendocrinos y del desarrollo.

Guía experimental y consejos técnicos

• Incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y minimice los ciclos de congelación-descongelación para preservar la señal de fosforilación.
• Utilice líneas celulares estimuladas con GDNF (por ejemplo, células de neuroblastoma o carcinoma de tiroides que expresen RET) como control positivo para la detección por western blot.
• Para verificar la especificidad por fosfato, preincube el anticuerpo con el inmunógeno péptido fosforilado; la señal debe ser bloqueada por el péptido fosforilado, pero no por el péptido no fosforilado correspondiente.
• Debido al gran tamaño de la proteína (124 kDa), considere utilizar un gel de SDS-PAGE de gradiente o de bajo porcentaje y tiempos de transferencia extendidos para obtener una resolución y eficiencia de transferencia óptimas.

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