Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-RIPK1 (S166) para WB, ELISA - Q13546

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Proteína Quinasa Serina/Treonina Interactuante con Receptor 1

• RIPK1, también conocida como RIP, RIP-1 o proteína de muerte celular RIP, es una quinasa serina-treonina codificada por el gen RIPK1; el empalme alternativo produce múltiples isoformas proteicas.
• Sirve como un regulador clave de la apoptosis, necroptosis y vías inflamatorias mediadas por TNF. Referencias relacionadas: PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280.
• RIPK1 exhibe funciones dependientes de la actividad quinasa que controlan la muerte celular y funciones de andamiaje independientes de la quinasa que promueven la señalización inflamatoria y la supervivencia celular. Referencias relacionadas: PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513.
• Tras la estimulación con TNF, RIPK1 es reclutada al complejo de señalización TNF-R1 (complejo I) donde actúa como un andamio para activar la vía canónica de NF-κB y promover la supervivencia celular.
• La actividad quinasa de RIPK1 impulsa el ensamblaje de complejos inductores de muerte: complejo IIa (RIPK1-FADD-CASP8) para apoptosis y complejo IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) para necroptosis.
• RIPK1 fosforila RIPK3, lo que lleva a una auto- y trans-fosforilación recíproca. Referencias relacionadas: PMID:19524513.
• Fosforila DAB2IP en Ser-728, activando así la cascada apoptótica MAP3K5-JNK. Referencias relacionadas: PMID:15310755, PMID:17389591.
• Subcelularmente, RIPK1 se encuentra en el citoplasma y asociada a la membrana celular; sufre fosforilación, ubiquitinación y otras modificaciones postraduccionales que regulan sus funciones de señalización.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético correspondiente a residuos alrededor de la serina 166 de RIPK1 humano; por lo tanto, el anticuerpo reconoce específicamente a RIPK1 cuando está fosforilada en este sitio.
• Para Western blot, utilice lisados de líneas celulares o tejidos humanos, ya que se reporta que el anticuerpo reacciona con RIPK1 humana; considere incluir inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar la fosforilación.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir optimización de las condiciones de recubrimiento y detección de RIPK1 fosforilada en lisados celulares o proteína recombinante; valide con controles positivos y negativos para fosforilación.
• El peso molecular predicho de RIPK1 es ~75 kDa; sin embargo, las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros cambios en la migración.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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