Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-RPA2-Ser33 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P15927

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Subunidad de 32 kDa de la Proteína A de Replicación

• RPA2 es la subunidad de 32 kDa del complejo heterotrimérico de proteína A de replicación (RPA), que también incluye RPA1 (70 kDa) y RPA3 (14 kDa). También se conoce como factor de replicación A proteína 2 (RF-A proteína 2) y RP-A p34.
• El complejo RPA se une y estabiliza el ADN de cadena simple (ssDNA) durante la replicación del ADN y después del daño del ADN, evitando la rehibridación y reclutando proteínas clave para el metabolismo del ADN.
• En la respuesta al daño del ADN, RPA2 facilita el reclutamiento de ATRIP, que activa la quinasa ATR, un regulador maestro de la señalización de puntos de control.
• RPA2 es esencial para el reclutamiento de factores de reparación del ADN como RAD51, RAD52, XPA y XPG a la cromatina en los sitios de daño del ADN, permitiendo la recombinación homóloga y la reparación por escisión de nucleótidos.
• El complejo también juega un papel en la reparación por escisión de bases (BER), probablemente a través de la interacción con UNG, y estimula la actividad de helicasa 5'-3' de BRIP1/FANCJ para promover el reinicio del horquilla de replicación. Referencias relacionadas: PMID:17596542
• RPA2 se localiza predominantemente en el núcleo y se puede encontrar en los cuerpos nucleares PML.
• Las modificaciones postraduccionales, incluyendo la fosforilación en Ser33, acetilación y ubiquitinación, regulan las funciones de RPA2 en la reparación y replicación del ADN.
• El splicing alternativo de RPA2 produce múltiples isoformas, contribuyendo a la diversidad funcional.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot (WB), valide la especificidad fosfo-específica comparando las señales entre muestras tratadas y no tratadas o usando tratamiento con fosfatasa lambda.
• En inmunofluorescencia (IF-P) e inmunohistoquímica (IHC-P), optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar el epítopo de fosforilación, ya que una sobre-fijación puede enmascarar el objetivo.
• Al usar ELISA, considere emparejar este anticuerpo fosfo-específico con un anticuerpo total de RPA2 para normalizar la carga de proteína y evaluar la estequiometría de fosforilación.
• Aunque es reactivo de forma cruzada con RPA2 de ratón y rata, confirme la homología de secuencia alrededor de Ser33 en estas especies para asegurar un reconocimiento consistente.

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