Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Fosfo-RPA2 (T21) para WB y ELISA - P15927

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RPA2

• RPA2 (también conocido como REPA2, RPA32, RP-A p32, RP-A p34) es la subunidad de 32 kDa del complejo heterotrimérico de proteína A de replicación (RPA), una proteína principal de unión al ADN monocatenario.
• El complejo RPA se une y estabiliza los intermediarios de ADN monocatenario formados durante la replicación del ADN o tras estrés del ADN, evitando su reanudación y reclutando proteínas implicadas en el metabolismo del ADN.
• En la respuesta celular al daño del ADN, RPA2 es esencial para reclutar el complejo quinasa ATRIP-ATR y factores de reparación como RAD51, RAD52, XPA, XPG y SMARCAL1 a la cromatina.
• RPA2 contribuye a la reparación por escisión de nucleótidos (NER) y a la reparación por escisión de bases (BER) a través de la interacción con UNG, y también puede desempeñar un papel en el mantenimiento de los telómeros.
• RPA estimula la actividad helicasa 5'-3' de BRIP1/FANCJ, facilitando el reinicio de la horquilla de replicación y la reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:17596542
• La localización subcelular es predominantemente nuclear, con enriquecimiento en cuerpos PML.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y ubiquitinación (enlace isopéptido, conjugación Ubl), lo que refleja su regulación dinámica.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, y se identifica como una fosfoproteína del proteoma de referencia.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor de T21 de RPA2 humano; se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada de T21. Utilice controles adecuados (por ejemplo, péptido no fosforilado o lisados tratados con fosfatasa) para confirmar la especificidad.
• Para el análisis de western blot (WB), el peso molecular predicho de RPA2 es de aproximadamente 29 kDa. Incluya inhibidores de fosfatasa durante la preparación de la muestra para preservar la fosforilación.
• El anticuerpo se ha aplicado en WB y ELISA. Optimice las diluciones y condiciones para su sistema experimental específico.
• Se informa reactividad cruzada con muestras de humano y rata; valide el rendimiento en otras especies si es necesario.
• Considere el uso de extractos nucleares o células con daño en el ADN para mejorar la detección, dada la localización nuclear de RPA2 y su papel en la respuesta al daño del ADN.

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