pAb de conejo Anti-Fosfoproteína ribosomal S6 (RPS6)-S240/244 para WB, IHC-P, IP, ELISA - P62753

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RPS6

• RPS6 codifica la proteína ribosomal S6 de 40S (también conocida como fosfoproteína NP33), un componente central de la subunidad ribosomal pequeña (40S).
• Es esencial para el control del crecimiento y la proliferación celular mediante la traducción selectiva de clases de ARNm, especialmente aquellos que contienen motivos de oligopirimidina terminal 5' (TOP). Referencias relacionadas: PMID:17220279
• Durante la biogénesis de ribosomas, RPS6 forma parte del procesosoma de la subunidad pequeña (SSU) en el nucléolo, contribuyendo al plegamiento, modificación y procesamiento del ARNr pre. Referencias relacionadas: PMID:34516797
• La localización subcelular abarca el citoplasma, el núcleo y el nucléolo, lo que refleja sus doble papel en la traducción de ARNm y el ensamblaje de ribosomas.
• Está sujeto a modificaciones postraduccionales extensas, que incluyen fosforilación en múltiples residuos (por ejemplo, Ser240/244), acetilación, ADP-ribosilación e hidroxilación; la fosforilación es clave para la regulación de la traducción.
• Clasificado como fosfoproteína y ribonucleoproteína, forma parte del proteoma de referencia; se estudia ampliamente como efector aguas abajo de la señalización de mTOR.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a Ser240 y Ser244 fosforilados, se espera que el anticuerpo detecte específicamente RPS6 solo cuando está doblemente fosforilado. Valide la especificidad comparando señales de células tratadas frente a no tratadas o mediante tratamiento con fosfatasa.
• Para Western blotting, use tampones de lisis con conservación de fosfato complementados con inhibidores de fosfatasas. Optimice la dilución del anticuerpo (por ejemplo, 1:500–1:2000) en una línea celular relevante estimulada con suero o factores de crecimiento para inducir la fosforilación de RPS6.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígeno pueden influir en la accesibilidad del epítopo. Incluya siempre controles positivos (tejido estimulado) y negativos (péptido bloqueador no fosforilado).
• Para inmunoprecipitación (IP), considere entrecruzar el anticuerpo a las perlas para evitar la interferencia de cadenas pesadas/ligeras alrededor de 29 kDa. El ELISA se puede usar para la cuantificación de RPS6 fosforilado en lisados celulares, pero confirme la linealidad y especificidad.

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