Anticuerpo Policlonal Anti-Fosfo-SHP1-Y564 (PTPN6) para WB, ELISA - P29350

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SHP-1 (PTPN6)

• SHP-1 (PTPN6) es una tirosina fosfatasa no receptora, también conocida como proteína tirosina fosfatasa de células hematopoyéticas (HCP), PTP-1C y SH-PTP1. La isoforma 1 se expresa en células hematopoyéticas, mientras que la isoforma 2 se encuentra en tejidos no hematopoyéticos.

• SHP-1 regula negativamente la señalización al desfosforilar quinasas de tirosina receptoras (RTK) como EGFR, PDGFR y FGFR, y al actuar sobre receptores que contienen motivos inhibidores basados en tirosina de inmunorreceptor (ITIM) como PDCD1 y LILRB1 para inhibir la activación de células inmunitarias. Referencias relacionadas: PMID:21258366, PMID:9733788, PMID:11907092, PMID:14739280, PMID:37932456

• Modula la señalización de receptores de citocinas (por ejemplo, el receptor de IL-4) y desfosforila dianas citoplasmáticas como STING1, LCK y STAT1, conectando así las vías inmunitarias innatas y adaptativas. Referencias relacionadas: PMID:9065461, PMID:34811497, PMID:38532423

• En el núcleo, SHP-1 desfosforila factores de transcripción como NFAT5 y regula la gluconeogénesis hepática a través del reclutamiento de ARN polimerasa II mediado por STAT5A en el promotor de PCK1. Referencias relacionadas: PMID:37595871

• Subcelularmente, SHP-1 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que concuerda con su doble función en la terminación de la señalización y el control transcripcional.

• La proteína está regulada por fosforilación (por ejemplo, en Y564) y presenta dominios SH2 además de sitios de conjugación similares a ubiquitina, lo que resalta su complejidad postraduccional.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor de Y564; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada de SHP-1. Incluya controles sin tratar y tratados con fosfatasa en el western blot para confirmar la fosfoespecificidad.
• Para WB, utilice condiciones desnaturalizantes estándar y considere agregar inhibidores de fosfatasas al tampón de lisis para preservar la fosforilación. El peso molecular predicho es de ~68 kDa, pero la migración real puede variar.
• Valide la reactividad del anticuerpo en su sistema de células o tejido de interés, particularmente en fuentes hematopoyéticas frente a no hematopoyéticas (diferencias en la expresión de isoformas).
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar para la detección de fosfo-SHP-1; el emparejamiento con un anticuerpo contra SHP-1 total puede permitir la normalización.
• Optimice las diluciones del anticuerpo y las condiciones de incubación, ya que los requisitos varían según los tipos de muestra y los diseños experimentales.

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