Ac anti-fosfo-SMAD1-S463/S465+SMAD5-S463/S465+SMAD9-S465/S467 de conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15797/Q99717/O15198

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SMAD1

• SMAD1 (homólogo 1 de mothers against decapentaplegic, también conocido como BSP1, JV4-1, MADH1) pertenece a la familia de mediadores intracelulares de los factores de transcripción SMAD.
• Tras la unión del ligando BMP, SMAD1 es fosforilado en Ser463/465 por los receptores BMP de tipo I activados, luego forma un complejo con SMAD4 y se transloca al núcleo. Referencias relacionadas: PMID:9335504 PMID:33667543
• Una vez en el núcleo, el complejo SMAD1/SMAD4 se une a elementos de unión a Smad (SBE) para regular la transcripción de genes diana involucrados en el desarrollo embrionario, la diferenciación celular y la homeostasis tisular.
• SMAD1 media la degradación del represor SNIP1 de CREBBP/EP300 a través de un complejo OAZ1/PSMB4, lo que modula aún más la expresión génica (Por similitud).
• A nivel subcelular, SMAD1 reside tanto en el citoplasma como en el núcleo, y la translocación nuclear depende de la fosforilación inducida por BMP.
• La expresión es ubicua, con los niveles más altos observados en el corazón y el músculo esquelético.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (activación), acetilación y ubiquitinación; la proteína también presenta motivos de unión al zinc.
• Palabras clave de UniProt: estructura 3D, Acetilación, Empalme alternativo, Unión a ADN, Unión a metales, Fosfoproteína, Regulación de la transcripción, Conjugación Ubl, Zinc.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado sintético que abarca el motivo de fosforilación conservado (SSVS) en SMAD1, SMAD5 y SMAD9; considere confirmar la especificidad comparando lisados celulares tratados con BMP frente a los no tratados en Western blot.
• Para Western blot, cargue lisados tratados apropiadamente e incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación; el tamaño de banda esperado es de aproximadamente 52 kDa, pero la fosforilación puede causar ligeras variaciones.
• Para IHC-P e IF/ICC, valide el anticuerpo con tejidos/células de control positivos y negativos donde se sabe que la señalización BMP está activa o inactiva; la tinción nuclear indica complejos SMAD activados.
• En ELISA, titre el anticuerpo contra péptidos fosforilados y no fosforilados para verificar la especificidad de fosfo.
• Se ha informado reactividad cruzada para humano, ratón y rata; asegure la alineación de la secuencia específica de la especie alrededor de los sitios de fosforilación antes de usarlo con otras especies.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

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